Achieving Shortest Run Time and Narrowest Peak Shape Using the Agilent 1290 Infinity II LC with Ultralow Dispersion Kit

Význam tématu

V oblasti analytické chemie roste poptávka po superrychlých a vysoce rozlišovacích metodách. Ultrakrátké chromatografické běhy se sub-2 µm kolonami a minimálním extracolumn objemem umožňují dosažení ostrých píků, vyššího počtu plat a zvýšení propustnosti laboratoří.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo optimalizovat dobu běhu a šířku píků při separaci devíti fenonů na platformě Agilent 1290 Infinity II LC vybavené Ultralow Dispersion Kitem. Vyvinuty byly ultrakrátké izokratické a gradientní metody s dobou běhu 27 a 16 s.

Použitá metodika a instrumentace

Instrumentace

• Agilent 1290 Infinity II High-Speed Pump G7120A
• Multisampler G7167B
• Multicolumn Thermostat G7116B
• Diode Array Detector G7117B
• Ultralow Dispersion Kit p n 5067-5963
• Kolona ZORBAX SB-C18 2.1×50 mm 1.8 µm

Chromatografické podmínky

• Mobilní fáze voda/acetonitril 45/55 pro izokratickou analýzu
• Průtok 2.5 mLmin
• Teplota kolony 90 °C
• Detekce 254 nm, referenční 360 nm
• Gradientní běh 0–0.1 min 55→95 % B

Hlavní výsledky a diskuse

Izokraticky byly devět fenonů baseline odděleny do 27 s s minimální šířkou píků W5σ přibližně 0.005 min a počtem plat až 1900. RSD retenčních časů i ploch pod 0.2 % a 1.5 %. Gradientní separace proběhla za 16 s s kapacitou až 100 píků na 30 s běhu. Systém zůstal stabilní při tlacích nad 1000 bar a 90 °C.

Přínosy a praktické využití metody

Ultrarychlé UHPLC analýzy umožňují značné zkrácení měřicích cyklů a zvýšení denní produktivity laboratoří. Metoda je ideální pro rutinní QA/QC, screening i složité matrice, kde je klíčová vysoká vzorková propustnost a přesnost.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj směřuje k minimalizaci extracolumn disperze, zdokonalení fittek a integraci UHPLC do automatizovaných high throughput pracovních stanic. Plánuje se rozšíření na širší spektrum sloučenin a kombinace s hmotnostní spektrometrií.

Závěr

Agilent 1290 Infinity II LC s Ultralow Dispersion Kitem dosahuje ultrakrátkých běhů a ostrých píků při vysoké reprodukovatelnosti. Technologie představuje významný posun v rychlosti a rozlišení UHPLC analýz fenonů a podobných sloučenin.

Reference

1 Schneider S Agilent 1290 Infinity LC System Applications requiring the Agilent Ultralow Dispersion Kit Agilent Technologies Application Note 59910826EN 2012
2 Schuhn B Schneider S Optimizing System Dispersion on the Agilent 1290 Infinity II LC Agilent Technologies Application Note 59915984EN 2015
3 Agilent A Line UHPLC Fittings Agilent Technologies Technical Overview 59915525EN 2015