Fast Analysis of Fat-Soluble Vitamins in Infant Milk Powder by Heart Cutting 2D-LC

Význam tématu

Přesné stanovení vitamínů A, D a E v kojeneckých formulích je klíčové pro zajištění správné výživy a bezpečnosti potravin určených pro nejmenší konzumenty.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo vyvinout rychlou a automatizovanou metodu heart-cutting 2D-LC pro simultánní analýzu vitamínů A, E a D3 v práškových mléčných směsích s minimální přípravou vzorku.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorek byl podroben saponifikaci, extrakci a filtraci podle normy GB 5413.9–2010. Analýza probíhá v jediném injekčním cyklu ve třech fázích:

• První dimenze: kolona ZORBAX RRHT Extend-C18 (4,6×50 mm, 1,8 µm) pro rychlé rozdělení VA a VE
• Heart-cutting: zachycení VD na koloně ZORBAX Extend-C18 (4,6×12,5 mm, 5 µm)
• Druhá dimenze: kolona ZORBAX Eclipse PAH (2,1×100 mm, 3,5 µm) pro separaci VD2/D3

Instrumentace: Agilent 1260 Infinity (quaternární a binární pumpy, autosampler, termostatická komora, DAD detektory s ultracitlivou a standardní komůrkou), software OpenLab CDS ChemStation.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosahuje vynikající linearity: VA 2,5–12,5 µg/mL (R2=0,99996), VE 50–250 µg/mL (R2=0,99984), VD3 0,05–0,25 µg/mL (R2=0,99988). LOD pro VD3 je 0,01 µg/mL (10 µg/kg). Reprodukovatelnost (tři injekce): RSD retenční doby <0,3 % a RSD plochy <1 %.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje simultánní stanovení všech tří vitamínů během 14 minut, minimalizuje přípravu vzorku, zvyšuje průchodnost laboratoře a snižuje náklady. Vysoká citlivost a specificita pro stopové množství VD3 zajišťují spolehlivou kontrolu kvality kojeneckých mlék.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se širší rozšíření ultrarapidní 2D-LC v rutinním QA/QC potravinářských laboratoří, rozšíření detekčních technik o hmotnostní spektrometrii pro širší spektrum analyzovaných látek a další automatizace přípravy vzorků.

Závěr

Popsaná heart-cutting 2D-LC metoda nabízí robustní, rychlý a nákladově efektivní nástroj pro simultánní stanovení vitamínů A, E a D3 v kojenecké výživě a splňuje požadavky národních norem.

Reference

1. Heudi O., et al. Rapid determination of vitamins in food matrices by HPLC. J. Chromatogr. A. 2004;1022:115–123.
2. GB 5413.9–2010. Determination of vitamin A, D, E in foods for infants and young children. Chinese National Standards.