Determination of Fat-Soluble Vitamins in Foods Using Agilent Chem Elut S Extraction with LC/DAD and LC/MS/MS Triple-Quadrupole

Význam tématu

Fat-solubilní vitaminy A, D a E představují klíčové nutriční složky sledované v potravinách pro zajištění imunity, růstu a kvality výrobků.

Cíle a přehled studie

Studie popisuje vývoj a ověření citlivé metodiky pro simultánní identifikaci a kvantifikaci vitaminů A (retinol), D2 (ergokalciferol), D3 (cholekalciferol) a E (α-tokopherol) v komplikovaných potravinových maticích (mléčné směsi pro kojence, vejce, tuňák v konzervě, houby).

Použitá metodika

Saponifikace vzorků při 75–80 °C, extrakce podporovanou kapalinu (SLE) s Agilent Chem Elut S 12 mL cartridgemi, dvakrát hexanovým eluátem, sušení dusíkem a reconstituce v metanolu.

Použitá instrumentace

• Agilent 1290 Infinity II LC s DAD (G7117B)
• Agilent 6470 triple kvadrupól LC/MS/MS (G6470) s AJS ESI+
• Agilent MassHunter software

Hlavní výsledky a diskuse

SLE vs. LLE zkrátilo přípravu o 30–50 % a snížilo množství matrice koextraktů. Linearita metody (R2 > 0,99) pro rozsahy 0,2–1000 ng/mL (LC/MS/MS) a 0,05–100 µg/mL (DAD). Obnovy 70–130 %, RSD ≤ 20 %. ILOQ stanovené na 0,5 ng/mL pro D2/D3, 50 ng/mL pro A a 0,5 µg/mL pro E, S/N > 10.

Přínosy a praktické využití metody

• Zvýšení reprodukovatelnosti a zkrácení doby přípravy
• Široké uplatnění v potravinářské kontrole, QA/QC a klinických studiích
• Efektivní potlačení matrice a zajištění vysoké citlivosti

Budoucí trendy a možnosti využití

• Další automatizace a miniaturizace vzorkové přípravy
• Rozšíření na další vitaminy a lipidově rozpustné látky
• Integrace s vysokorozlišovací MS a multidimenzionální chromatografií

Závěr

Popsaná UHPLC-DAD-MS/MS metoda společně se SLE extrakcí umožňuje spolehlivé a rychlé stanovení vitamínů A, D a E v různých potravinových matricích s vysokou přesností a citlivostí.

Reference

1. Reddy P., Jialal I. Fat-Soluble Vitamins. StatPearls 2022.
2. Devries J.W., Silvera K.R. Determination of Vitamins A (Retinol) and E (Alpha-Tocopherol) in Foods by Liquid Chromatography: Collaborative Study. J. AOAC Int. 2002;85:424–434.
3. Gill B.D., Indyk H.E. Analysis of Vitamin D2 and Vitamin D3 in Infant and Adult Nutritional Formulas by Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry: A Multilaboratory Testing Study. J. AOAC Int. 2018;101:256–263.