Agilent 1290 Infinity 2D-LC Solution for Multiple Heart-Cutting

Význam tématu

Moderní dvourozměrná kapalinová chromatografie 2D-LC s multiple heart-cutting rozšiřuje možnost selektivního sledování klíčových sloučenin v komplexních matricích. Zvyšuje rozlišovací schopnost vůči jednorozměrné chromatografii, zlepšuje detekční limity a umožňuje detailní charakterizaci cílených analytů např. v oblasti farmacie, potravinářských produktů či environmentální analýzy.

Cíle a přehled studie / článku

Tento technický přehled popisuje řešení Agilent 1290 Infinity 2D-LC pro multiple heart-cutting. Cílem je předvést: optimalizované rozhraní s parkováním 1D frakcí, intuitivní softwarovou podporu pro metody srdcového odříznutí, automatizaci měření a zabezpečení spolehlivosti výsledků. Studie demonstruje srovnání se standardní 1D-LC, kvantifikační výkon i opakovatelnost analýzy.

Použitá metodika a instrumentace

Pro první rozměr byla použita chromatografie na sloupci ZORBAX C18 (100×2,1 mm, 1,8 μm) při gradientu 20–100 % organické fáze za 50 min při průtoku 0,6 mL/min. Druhý rozměr využíval sloupce ZORBAX Bonus RP (50×2,1 mm, 1,8 μm) s cyklem 1,75 min při 1 mL/min. Klíčovou komponentou je vícepozicový 2-port/4-port duo-ventil a dvě parkovací desky po 6 smyčkách (40 μL), což umožňuje odběr a parkování až 12 frakcí v průběhu 2D-cyklů. Systém doplňuje Agilent 1290 Infinity Quaternary/Binary pumpa, autosampler, termostatický compartment a DAD detektor s buňkami 10 nebo 60 mm.

Hlavní výsledky a diskuse

Multiple heart-cutting umožnilo vybrat až 15 frakcí z různých časových pozic 1D chromatogramu pomocí režimu založeného na čase nebo na detekci vrcholu. Díky parkování dochází k minimalizaci ztrát a nesprávných odběrů při přepínání ventilů. Systém prokázal vynikající lineárnost (R2>0,999) v rozsahu 0,5–1000 µg/mL a opakovatelnost (RSD <10 %, v praxi i <5 %). 2D chromatogramy vykazovaly vyšší absorpční signály (než 1D), zejména využitím 60mm DAD buňky, a lepší rozlišení souběžně koelutujících sloučenin.

Přínosy a praktické využití metody

• Výrazné zlepšení selektivity a citlivosti pro cílené sloučeniny v komplexních vzorcích.
• Automatizované parkování frakcí zajišťuje konzistentní výsledky bez manuálních zásahů.
• Intuitivní softwarové nástroje urychlují vývoj metod a vizualizaci 2D dat.
• Možnost implementace v rutinním QA/QC laboratoři i pokročilých výzkumných pracovištích.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření 2D-LC se smyčkami ve spojení s hmotnostní spektrometrií pro detailní strukturální analýzu. Další oblastí jsou omické aplikace v proteomice a metabolomice, analýza složitých přírodních produktů i polymerních příměsí. Integrace se strojovým učením a pokročilou vizualizací 2D dat může přinést vyšší automatizaci a prediktivní možnosti.

Závěr

Agilent 1290 Infinity 2D-LC řešení pro multiple heart-cutting představuje robustní a vysoce výkonnou technologii pro cílené analýzy v náročných matricích. Díky inovativnímu rozhraní, parkovacím smyčkám a pokročilému softwaru metoda spolehlivě zvyšuje selektivitu, opakovatelnost i citlivost 2D analýzy. Tato platforma přináší výrazný přínos v oblasti farmacie, životního prostředí i průmyslové kontroly kvality.

Reference

1. Stoll DR, et al. J. Chromatogr. A. 2007;1168:3–43.
2. Dugo P, et al. J. Chromatogr. A. 2008;1184:353–363.
3. Talus ES, Witt KE, Stoll DR. J. Chromatogr. A. 2015;1378:50–57.
4. Vanhoenacker G, et al. Agilent 1290 Infinity 2D-LC Solution Application Note. 2014;5991-2880EN.
5. Murphy RE, Schure MR, Foley JP. Anal. Chem. 1998;70:1585–1593.
6. Naegele E. Application Note: 2D-LC Heart Cutting. 2013;5991-0834EN.
7. Agilent Technologies. 2D-LC Solution User Manual. 2015;G2198-90001.
8. Pursch M, Buckenmaier SMC. Anal. Chem. (in press).
9. Groskreutz SR, et al. J. Chromatogr. A. 2012;1228:31–40.
10. Groskreutz SR, et al. J. Chromatogr. A. 2012;1228:41–50.
11. Zhang K, et al. J. Sep. Sci. 2013.
12. Venkatramani CJ, et al. J. Sep. Sci. 2014;37:3214–3225.
13. Schneider S, Naegele E, Krieger S. Agilent App. Note. 2015;5991-5349EN.
14. Krieger S. Agilent App. Note. 2015;5991-5843EN.
15. Buckenmaier SMC, Pursch M. Pesticides in Natural Products Whitepaper.