Analysis of a Fixed–Dose Combination Drug Using the Agilent 1290 Infinity II Evaporative Light Scattering Detector

Význam tématu

Evaporativní detekce světelným rozptylem představuje nezbytnou metodu pro stanovení polovolatilních a nevolatilních sloučenin bez UV chromatoforu. Rozšíření dynamického rozsahu této techniky umožňuje současnou kvantifikaci látek s velmi odlišnými koncentracemi v jediném běhu LC analýzy, což zvyšuje efektivitu práce ve farmacii a biologii.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo ověřit schopnosti detektoru Agilent 1290 Infinity II ELSD s rozšířeným dynamickým rozsahem (HDR) při analýze fixní kombinace léčiv s poměrem složek až 80:1. Srovnáním s konvenčním ELS detektorem byly porovnány linearita, přesnost plošných integrací a citlivost pro nízké i vysoké koncentrace v jednom průběhu.

Použitá instrumentace

• LC systém Agilent 1290 Infinity II
• Evaporative Light Scattering Detector (G7102A) s HDR fotonásobičem
• Konvenční ELSD (G4261B) pro srovnání
• Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18 kolona, 4.6×100 mm, 5 µm
• Diodový array detektor Agilent 1290 DAD (G7117B)

Použitá metodika

Vzorek tvořila směs paracetamolu, chlorfenaminu, kyseliny askorbové a kofeinu v poměru 80:1:60:10. Po rozpuštění kapslí v destilované vodě a ultrazvukové extrakci byly roztoky filtrovány a připraveny v několika ředěních (1:10 až 1:50). Chromatografie probíhala gradientně při 1 mL/min a 40 °C s mobilní fází A (voda+0,1 % TFA) a B (acetonitril+snížené TFA), s časem běhu 10 minut.

Hlavní výsledky a diskuse

Detektor Infinity II ELSD prokázal lineární odezvu až ve čtyřech dekádách, umožňující kvantifikaci paracetamolu od 400 do 2000 ng/µL s korelačním koeficientem 0,9996. Chlorfenamin byl kvantifikován od 5 do 25 ng/µL s korelací 0,9969. Konvenční ELSD vykazoval saturaci pro vysoké koncentrace a nízké signály s deformovanými piky, což vyžadovalo vícenásobné injekce a další ředění. Přesnost ploch u Infinity II ELSD byla lepší než 3 % pro většinu sloučenin, u chlorfenaminu do 18 % při nedilutovaném vzorku.

Přínosy a praktické využití metody

Vysoký dynamický rozsah a téměř lineární odezva zkracují čas analýzy a eliminují potřebu opakovaných měření a složitého ředění vzorků. Metoda je ideální pro QA/QC rutiny, vývoj generik a stabilitní studie, kde se ve stejném běhu sledují labilní i koncentráčně odlišné složky.

Budoucí trendy a možnosti využití

Integrace HDR ELSD do automatizovaných LC platforem a kombinace s hmotnostní spektrometrií otevře nové aplikace ve screeningových studiích, metabolomice a kontrole kvality ve farmaceutickém i potravinářském průmyslu. Další vývoj směřuje k zvýšení linearity a citlivosti pro ultra stopové látky.

Závěr

Detektor Agilent 1290 Infinity II ELSD díky řízené nelineární zesilovací buňce nabízí dynamický rozsah čtyř dekád, což umožňuje v jediné injekci přesnou kvantifikaci komponent s poměrem až 80:1. Tím výrazně zvyšuje efektivitu a spolehlivost chromatografických analýz.

Reference

Agilent Technologies. Application Note 5991-5601EN: Analysis of a Fixed–Dose Combination Drug Using the Agilent 1290 Infinity II ELSD.