Development of an LC/MS/MS Method for Bupropion in Human Plasma Using a 6460 Triple Quadrupole LC/MS System

Význam tématu

Aplikace LC/MS/MS pro stanovení léčiv v biologických matricích je klíčová pro biofarmaceutický výzkum, klinické studie a monitorování léčiv. Rychlé přenosy validovaných metod mezi laboratořemi a odlišnými platformami přístrojů usnadňují standardizaci analýz a zkracují dobu potřebnou ke zpřístupnění výsledků.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo demonstrovat bezproblémový přenos LC/MS/MS metody pro stanovení bupropionu v lidské plasmě z původního Shimadzu LC-20A/ABI SCIEX API 4000 systému na Agilent 1290 Infinity LC spojený s Agilent 6460 Triple Quadrupole MS, přičemž zůstaly zachovány chromatografické a MRM podmínky.

Použitá metodika

Vzorky (100 µL plazmy) byly spiked interním standardem (risperidon, 500 ng/mL, 50 µL), doplněny 100 µL 1 mM amonium formiátu a precipitovány 1 mL methanolu. Po centrifugaci (4 °C, 4500 rpm, 15 min) byl supernatant analyzován.

Použitá instrumentace

• Agilent 1290 Infinity LC System
• Agilent 6460 Triple Quadrupole LC/MS System
• Agilent Jet Stream ionizační zdroj
• Sloupec Gemini C18 (50 × 3 mm, 5 µm)

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda prokázala lineární rozsah 1,5–456 ng/mL (R2 ≥ 0,998). LLOQ (1,502 ng/mL) dosáhlo CV 3,8 % a S/N 1600. Meziproduktová přesnost a přesnost QC vzorků (4,38; 187,1; 346,6 ng/mL) vykázala CV 6,7–7,7 % a průměrnou přesnost 98,2–103,9 %. Pět šarží potvrdilo reprodukovatelné výsledky při minimálních úpravách zdrojových parametrů.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje rychlý přenos mezi platformami s minimální odstávkou, zachovává citlivost a spolehlivost. Je vhodná pro farmakokinetické studie, terapeutický monitoring a rutinní bioanalytické aplikace.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření automatizované přípravy vzorků, využití vysokorychlostních a vysokorozlišovacích MS systémů, multiplexní analýza příbuzných molekul a využití strojového učení pro optimalizaci metody.

Závěr

Přenos LC/MS/MS metody pro bupropion do Agilent 6460 Triple Quadrupole proběhl úspěšně bez změn chromatografických podmínek. Výsledky splňují akceptační kritéria validace, metoda je robustní a efektivní.

Reference

• Zhou S., et al. Critical Review of Development, Validation, and Transfer for High Throughput Bioanalytical LC–MS/MS Methods. Current Pharmaceutical Analysis, 2005, 1:3–14.
• Bansal S., DeStefano A. Key Elements of Bioanalytical Method Validation for Small Molecules. The AAPS Journal, 2007, 9(1), Article 11.