A Scaled USP Method for Fluconazole Using an ACQUITY UPLC I-Class System and CORTECS T3 Column Chemistry

Význam tématu

V oblasti farmaceutické analýzy je striktní kontrola kvality účinných látek a jejich nežádoucích produktů klíčová. USP metody pro fluconazol stanovují přesné chromatografické podmínky, ale tradiční HPLC s 3 µm částicemi přináší dlouhé doby analýz a vysokou spotřebu organických rozpouštědel. Přechod na UPLC s pevným jádrem částic, zejména na CORTECS T3, umožňuje zkrácení doby běhu, snížení nákladů na rozpouštědla a zvýšení laboratorní kapacity, přičemž je nutné respektovat regulované poměry parametrů L/dp.

Cíle a přehled článku

Článek popisuje přenos a škálování oficiální USP metody pro stanovení fluconazolu a souvisejících nečistot z HPLC na UPLC. Hlavním cílem bylo dosažení ekvivalentní nebo lepší chromatografické separace při zachování souladu s USP požadavky na systémovou vhodnost (L/dp, rozlišení a opakovatelnost). Studie porovnává výkon tří sloupců s různou chemií a porozitou částic.

Použitá metodika a instrumentace

Chromatografická metoda byla odvozena z USP monografie (Procedure I 3). Podmínky byly přepočítány pomocí Waters Columns Calculatoru, který zajišťuje správný poměr délky kolony k průměru částic, průtok a objem injekce podle porosity faktoru částic.

Použitá instrumentace

• ACQUITY UPLC I-Class System
• ACQUITY UPLC PDA detektor
• Kolony: CORTECS UPLC T3 (1,6 µm, 2,1×75 mm), CORTECS UPLC C18+ (1,6 µm, 2,1×75 mm), ACQUITY UPLC HSS T3 (1,8 µm, 2,1×75 mm)
• Software: Empower 3 FR2

Hlavní výsledky a diskuse

Optimalizovaná metoda na CORTECS T3 sloupci dosáhla

• běhu pod 2 minuty (oproti 10 min originální HPLC)
• všechny USP požadavky na rozlišení souvisejících nečistot ≥ 1,5 splněny (Rel. comp B–C = 2,80)
• relativní RSD ploch i retenčních časů pod 5 %

Porovnání s plně porézní kolonkou HSS T3 ukázalo, že solid-core částice poskytly až o 50 % dřívější eluční časy, výrazně užší šířky píků a lepší chromatografickou účinnost (N), což potvrzuje rychlejší rozběh testu a vyšší produktivitu.

Přínosy a praktické využití metody

Implementace škálované UPLC metody přináší praktické výhody:

• výrazné snížení spotřeby organických rozpouštědel
• zvýšení denní kapacity analýz laboratorního pracoviště
• nižší provozní náklady a ekologická šetrnost
• shoda s regulačními požadavky USP

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj analytických postupů bude směřovat k:

• integrovanému online monitoringu a automatizaci škálování
• uplatnění ještě menších částic a vyšších tlaků pro rychlejší analýzy
• rozšíření pevnojádrových technologií na další druhy farmaceutických sloučenin
• využití umělé inteligence pro optimalizaci parametrů chromatografie

Závěr

Škálování USP metod z HPLC na UPLC s využitím CORTECS T3 kolony prokázalo, že lze dosáhnout stejné nebo lepší separace fluconazolu a nečistot při výrazném zkrácení doby analýzy a úspoře rozpouštědel. Waters Columns Calculator usnadňuje přepočet parametrů, zatímco pevnojádrové částice zajišťují vyšší účinnost, užší píky a vyšší propustnost laboratoře.

Reference

• Chapter <621> CHROMATOGRAPHY. United States Pharmacopeia and National Formulary (USP 37-NF 32 S2), 2014, s. 6376–85.
• Snyder L.R., Kirkland J.J., Dolan J.W., Introduction to Liquid Chromatography, 3rd ed., Wiley, 2010.
• Official Monographs, USP 37 NF 32 S2, United States Pharmacopeia and National Formulary, 2014, s. 4968.