Highly Analytically-sensitive Analysis of Aldosterone in Plasma on the Xevo TQ-XS for Clinical Research
Aplikace | 2016 | WatersInstrumentace
Aldosteron je mineralkortikoidní steroidový hormon s klíčovou rolí v regulaci sodíku, draslíku a krevního tlaku. V klinickém výzkumu je monitoring jeho koncentrace důležitý zejména při hodnocení inhibitorů aldosteron syntázy a v diagnostice poruch renin-angiotenzin-aldosteronového systému. Kvůli nízkým hladinám v plasmatických vzorcích (<25 pg/mL) vyžaduje analýza vysoce citlivé a reprodukovatelné metody.
Cílem studie bylo porovnat analytickou citlivost a přesnost metody LC-MS/MS pro stanovení aldosteronu v plasmě mezi hmotnostními spektrometry Waters Xevo TQ-XS a Xevo TQ-S. Provedla se měření nízkých koncentračních roztoků i extraktů z plazmy, včetně opakovaných analýz na různých dnech.
Aldosteron byl extrahován z plasmatu precipitací roztokem síranu zinečnatého v methanolu, následovalo ředění kyselinou fosforečnou a aplikace na Oasis MAX µElution desorpční kelímky. Vzorky prošly sekvenčním mytím (kyselina fosforečná, amoniak v 10 % methanolu, voda) a eluovány 70 % vodným methanolem. Následovala diluce vodou a injekce na ACQUITY UPLC I-Class na CORTECS C18 kolonu s gradientem vody a methanolu. Monitorovány byly MRM přechody 359,2 → 189,0 (kvantifikátor) a 359,2 → 297,2 (kvalifikátor) pro analyzát; interním standardem byl aldosteron-4H2 s přechodem 363,2 → 190,0.
Porovnáním 1 pg/mL roztoku aldosteronu se na Xevo TQ-XS dosáhlo signifikantně vyššího signál-šum poměru (RMS = 54 vs. 9 na TQ-S) a nižší RSD (< 2 %, n = 3). Nízký kalibrátor v odvirované plasmě (15 pg/mL) a extrakt plasmy (11,6 pg/mL) vykazovaly lepší reprodukovatelnost na TQ-XS napříč třemi dny. Celková impreciznost metody (QC body 21–669 pg/mL) se u TQ-XS snížila na 3,9–7,9 %, zatímco TQ-S dosahoval 5,0–8,3 %.
Metoda s vysokou citlivostí umožní aplikaci v farmakokinetických a farmakodynamických studiích nízkodávkových inhibitorů aldosteron syntázy. Další vývoj může zahrnovat automatizaci přípravy vzorků a multikriteriální screening hormonů v malých objemech biologických kapalin.
Xevo TQ-XS významně rozšiřuje možnosti citlivé analýzy aldosteronu v plasmě, poskytuje lepší signál-šum, nižší impreciznost a širší dynamický rozsah, což přispívá k přesnější a spolehlivější podpoře klinického výzkumu.
LC/MS, LC/MS/MS, LC/QQQ
ZaměřeníKlinická analýza
VýrobceWaters
Souhrn
Význam tématu
Aldosteron je mineralkortikoidní steroidový hormon s klíčovou rolí v regulaci sodíku, draslíku a krevního tlaku. V klinickém výzkumu je monitoring jeho koncentrace důležitý zejména při hodnocení inhibitorů aldosteron syntázy a v diagnostice poruch renin-angiotenzin-aldosteronového systému. Kvůli nízkým hladinám v plasmatických vzorcích (<25 pg/mL) vyžaduje analýza vysoce citlivé a reprodukovatelné metody.
Cíle a přehled studie
Cílem studie bylo porovnat analytickou citlivost a přesnost metody LC-MS/MS pro stanovení aldosteronu v plasmě mezi hmotnostními spektrometry Waters Xevo TQ-XS a Xevo TQ-S. Provedla se měření nízkých koncentračních roztoků i extraktů z plazmy, včetně opakovaných analýz na různých dnech.
Použitá metodika a příprava vzorků
Aldosteron byl extrahován z plasmatu precipitací roztokem síranu zinečnatého v methanolu, následovalo ředění kyselinou fosforečnou a aplikace na Oasis MAX µElution desorpční kelímky. Vzorky prošly sekvenčním mytím (kyselina fosforečná, amoniak v 10 % methanolu, voda) a eluovány 70 % vodným methanolem. Následovala diluce vodou a injekce na ACQUITY UPLC I-Class na CORTECS C18 kolonu s gradientem vody a methanolu. Monitorovány byly MRM přechody 359,2 → 189,0 (kvantifikátor) a 359,2 → 297,2 (kvalifikátor) pro analyzát; interním standardem byl aldosteron-4H2 s přechodem 363,2 → 190,0.
Použitá instrumentace
- LC systém: Waters ACQUITY UPLC I-Class
- Kolona: Waters CORTECS C18
- Spektrometry: Waters Xevo TQ-XS a Xevo TQ-S s ESI zdrojem
- Iontová optika: StepWave™ XS (u TQ-XS)
- Detektor: Xtended Dynamic Range (XDR) (u TQ-XS)
Hlavní výsledky a diskuse
Porovnáním 1 pg/mL roztoku aldosteronu se na Xevo TQ-XS dosáhlo signifikantně vyššího signál-šum poměru (RMS = 54 vs. 9 na TQ-S) a nižší RSD (< 2 %, n = 3). Nízký kalibrátor v odvirované plasmě (15 pg/mL) a extrakt plasmy (11,6 pg/mL) vykazovaly lepší reprodukovatelnost na TQ-XS napříč třemi dny. Celková impreciznost metody (QC body 21–669 pg/mL) se u TQ-XS snížila na 3,9–7,9 %, zatímco TQ-S dosahoval 5,0–8,3 %.
Přínosy a praktické využití metody
- Detekce aldosteronu v plasmě až na úrovni 1 pg/mL s RSD < 2 %
- Široký lineární rozsah díky XDR detektoru
- Vyšší signál-šum poměr a lepší reprodukovatelnost
- Možnost přímého přenosu metod z předchozích generací přístrojů
Budoucí trendy a možnosti využití
Metoda s vysokou citlivostí umožní aplikaci v farmakokinetických a farmakodynamických studiích nízkodávkových inhibitorů aldosteron syntázy. Další vývoj může zahrnovat automatizaci přípravy vzorků a multikriteriální screening hormonů v malých objemech biologických kapalin.
Závěr
Xevo TQ-XS významně rozšiřuje možnosti citlivé analýzy aldosteronu v plasmě, poskytuje lepší signál-šum, nižší impreciznost a širší dynamický rozsah, což přispívá k přesnější a spolehlivější podpoře klinického výzkumu.
Reference
- Foley D. Highly Analytically-sensitive Analysis of Aldosterone in Plasma on the Xevo TQ-XS for Clinical Research, Waters Corporation, 2016.
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.
Podobná PDF
HOW LOW CAN WE GO? ANALYSIS OF ALDOSTERONE USING A HIGHLY ANALYTICALLY SENSITIVE TANDEM QUADRUPOLE MASS SPECTROMETER FOR CLINICAL RESEARCH
2016|Waters|Postery
HOW LOW CAN WE GO? ANALYSIS OF ALDOSTERONE USING A HIGHLY ANALYTICALLY SENSITIVE TANDEM QUADRUPOLE MASS SPECTROMETER FOR CLINICAL RESEARCH Dominic Foley1, Lisa J Calton1 1 Waters Corporation, Stamford Avenue, Altrincham Road, Wilmslow, SK9 4AX, UK INTRODUCTION Aldosterone plays a…
Klíčová slova
aldosterone, aldosteronexevo, xevounispray, unisprayimprecision, imprecisionplasma, plasmapmol, pmolanalytical, analyticalsteroid, steroiddeming, demingsensitivity, sensitivityarea, areaesi, esiclinical, clinicalpeak, peakglomerulosa
Analysis of Aldosterone in Plasma for Clinical Research using the ACQUITY UPLC I-Class/Xevo TQ-S micro System
2018|Waters|Aplikace
[ TECHNOLOGY BRIEF ] Analysis of Aldosterone in Plasma for Clinical Research using the ACQUITY UPLC I-Class/Xevo TQ-S micro System Dominic Foley Waters Corporation, Wilmslow, UK A highly selective, sensitive research method utilizing automated sample preparation and UPLC-MS/MS for the…
Klíčová slova
aldosterone, aldosteronexevo, xevomicro, microuplc, uplcplasma, plasmabrief, brieftechnology, technologyresearch, researchclinical, clinicalselective, selectiveacquity, acquityclass, classconjunction, conjunctionlow, lowmineralocorticoid
UPLC-MS/MS Analysis of Aldosterone in Plasma for Clinical Research
2015|Waters|Aplikace
UPLC-MS/MS Analysis of Aldosterone in Plasma for Clinical Research Dominic Foley and Lisa Calton Waters Corporation, Wilmslow, UK A P P L I C AT I O N B E N E F I T S ■■ Analytical selectivity improves…
Klíčová slova
aldosterone, aldosteroneuplc, uplcclinical, clinicalpmol, pmolresearch, researchplasma, plasmaanalytical, analyticalanalytically, analyticallyphysiological, physiologicalinterferences, interferenceslow, lowoasis, oasisacquity, acquitytracking, trackingsensitivity
Analysis of Testosterone Using the Xevo TQ-XS for Clinical Research
2016|Waters|Aplikace
[ TECHNOLOGY BRIEF ] Analysis of Testosterone Using the Xevo TQ-XS for Clinical Research Dominic Foley Waters Corporation, Wilmslow, UK The Xevo TQ-XS provides high analytical sensitivity for the analysis of testosterone from a small sample volume. GOAL To demonstrate…
Klíčová slova
testosterone, testosteronexevo, xevoserum, serumesi, esibrief, briefrms, rmsclinical, clinicalstructurally, structurallyanalytical, analyticalsensitivity, sensitivityresearch, researchfoley, foleyquantitative, quantitativetechnology, technologydominic
