Improving Drug Metabolite Identification in Biofluids with the ACQUITY PREMIER and Hybrid Organic Surface Technology: Increased Sensitivity and Reproducibility

Význam tématu

Metabolitická identifikace léků je klíčová fáze ve vývoji léčiv. LC-ESI-MS/MS poskytuje vysokou citlivost a strukturní informace, avšak povrchová interakce přechodných kovů s analyty může zhoršovat tvar špiček a snižovat signál.

Cíle a přehled studie

Studie hodnotí výkon chromatografického systému ACQUITY PREMIER s povrchovou technologií MaxPeak HPS při analýze metabolitů gefitinibu v myší moči, s cílem zvýšit rozlišení, odezvu a reprodukovatelnost.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorky moči byly zředěny vodou s 0,1 % kyselinou formiovou, centrifugovány a analyzovány trojím opakováním režimu LC-MSE.

• Chromatograf ACQUITY PREMIER a UPLC I-Class PLUS
• Kolony ACQUITY PREMIER HSS T3 2,1×100 mm, 1,8 µm
• MS systém SYNAPT XS, ESI+, m/z 50–1000
• Software MassLynx v4.2, Progenesis QI, Skyline

Hlavní výsledky a diskuse

ACQUITY PREMIER vykázal zkrácenou šířku špiček 0,09 min versus 0,12 min u standardní kolony, zvýšení chromatografické kapacity z 83 na 111 a nárůst intenzity signálu až o 72 %. Pro metabolit M523595 byla zaznamenána dvojnásobná odezva. Nižší variabilita mezi replikáty umožnila konzistentní detekci stopových metabolitů.

Přínosy a praktické využití metody

Vylepšené chromatografické rozlišení a vyšší citlivost umožňují spolehlivější identifikaci a kvantifikaci nízce koncentrovaných metabolitů. Metodu lze využít při mikro dávkování, mikro odběrech a podporuje iniciativu 3R ke snížení použití zvířat v toxikologických studiích.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozšíření hybridního povrchu na různé typy kolony, integrace s iontovou mobilitou a pokročilé softwarové nástroje slibují další zlepšení kvality dat. Metoda se předpokládá pro aplikace ve FTHM klinických studiích a detailní farmakokinetické analýze.

Závěr

Systém ACQUITY PREMIER s hybridním organickým povrchem výrazně redukuje nežádoucí interakce kovů, zlepšuje tvar chromatografických špiček, citlivost a reprodukovatelnost, což je zásadní při analýze stopových metabolitů.

Reference

1. A Wakamatsu et al J Sep Sci 2005 28 1823–1830
2. D McKillop et al Xenobiotica 2005 4(4) 914–934
3. X Liu et al Biochem Pharmacol 2015 97(1) 111–121
4. Q Zhang et al Oncotarget 2017 8(42) 72447–72456