UF-Amino Station LC/MS Ultra Fast Amino Acid Analysis System (Part 2) - Improved Sample Analysis Reliability

Význam tématu

Analýza aminokyselin je klíčová v potravinářství, biochemickém výzkumu i klinické diagnostice. Komplexní matrice vzorků, jako jsou mléko nebo biologické tekutiny, však často ztěžují spolehlivou kvantifikaci. Rychlá a selektivní metoda tedy může významně zlepšit kvalitu dat a efektivitu laboratoří.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem je představit UF-Amino Station – integrovaný systém pro ultrarychlou analýzu aminokyselin s LC/MS detekcí a automatizovanou derivatizací. Studie porovnává výkon tohoto systému s klasickou UHPLC-UV metodou s prekolonovou derivatizací pomocí phenyl isothiocyanátu (PITC).

Použitá metodika a instrumentace

Aminokyseliny byly v odtučněném mléce, kultivačním médiu a plazmě potkana extrahovány deproteinací (acetonitril), následně derivatizovány PITC automatem SIL-20AC PT. Chromatografické podmínky:

• Kolona Shim-pack XR-ODS, 100×3,0 mm, 2,6 µm
• Mobilní fáze: 50 mM fosfátový pufr (pH 7,0) / acetonitril, gradientní eluce
• Průtok 0,9 ml/min, teplota 40 °C
• Detekce: LC/MS v UF-Amino Station, UV detektor SPD-20AV (254 nm) u srovnávací metody

Hlavní výsledky a diskuse

Srovnání chromatogramů ukázalo, že UHPLC-UV s PITC naráží na zkřížené špičky a a priori nedostatečnou selektivitu při krátkém běhu. Naproti tomu UF-Amino Station používá selektivní MS detekci, kdy každý analyzát je vyhodnocován v samostatném masovém chromatogramu. Výsledkem jsou čisté špičky, minimální interference a vysoká kvantitativní spolehlivost. Obnova aminokyselin ze vzorků odtučněného mléka dosahovala blízko 100 %, což dokládá vysokou přesnost metody. Podobné oddělení bez rušivých vlivů bylo prokázáno i u kultivačního média a plazmy potkana.

Přínosy a praktické využití metody

UF-Amino Station nabízí:

• Rychlejší analýzu (ultrarychlé běhy) bez kompromisů v kvalitě
• Kvantitativně spolehlivé výsledky v náročných matricích
• Automatizovanou derivatizaci zlepšující přesnost a opakovatelnost
• Vhodnost pro potravinářskou kontrolu, bioprocesy, klinický výzkum a QA/QC laboratoře

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření metodiky o multiplexní detekci širší škály aminokyselin a jejich derivátů, integrace s datovými analytickými platformami a miniaturizace systému pro on-line monitoring bioprocesů či pole analytiky.

Závěr

UF-Amino Station kombinuje zrychlenou chromatografii, selektivní LC/MS detekci a automatizovanou derivatizaci, což vede k výjimečné spolehlivosti a přesnosti analýzy aminokyselin i v komplikovaných vzorcích. Metoda významně zvyšuje efektivitu práce i kvalitu dat v různých aplikačních oblastech.

Reference

1. Shimadzu Corporation. UF-Amino Station LC/MS Ultra Fast Amino Acid Analysis System (Part 2). Application News No. L434, 2014.
2. Shimadzu Corporation. Application News No. L433. Automatizované derivatizace v SIL-20AC PT.
3. Ajinomoto Co., Inc. Data on amino acid analysis in serum-free culture medium.