Screening of antioxidants present in unripe Manilkara zapota fruit of Indian origin using LC-MS/MS

Význam tématu

Antioxidanty jsou klíčové přírodní sloučeniny schopné zachytávat volné radikály a zpomalovat oxidativní degradaci tuků a dalších biomolekul. Jejich přítomnost v ovoci a zelenině přispívá ke snížení rizika chronických onemocnění spojených se stárnutím a podporuje prodloužení skladovatelnosti potravin.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo provést screening a identifikaci hlavních polyfenolických antioxidantů v nezralých plodech stromu Manilkara zapota indického původu. Autory vedla snaha nalézt nové, dostupné zdroje přírodních antioxidantů vhodných pro potravinářské, nutraceutické a farmaceutické aplikace.

Použitá metodika a instrumentace

Pro izolaci antioxidantů byl použit dvoufázový postup extrakce a čistění:

• Extrakce 100 g dužiny v metanolu (poměr 1:1), mletí, zahřátí na 2 h a filtrace.
• SPE na C-18 kartuších: mytí vodou (pH 7, odstraňování fenolových kyselin), eluce ethylacetátem (katechiny) a následně diethyl etherem a isopropanolem (oligomerní proanthokyanidiny).

Analýza proběhla pomocí UHPLC v kombinaci s triple kvadrupólovým hmotnostním spektrometrem Shimadzu LCMS-8030. Hmotnostní spektrometr pracoval v režimu ESI pozitivním i negativním, s teplotou desolvační trubice 250 °C, heat block 400 °C, tokem nebulizačního plynu 3 L/min a sušícího plynu 15 L/min.

Hlavní výsledky a diskuse

Byly detekovány a potvrzeny hlavní polyfenolické antioxidanty:

• Catechin a epicatechin (pozitivní produktový iontový scan).
• Gallocatechin gallate a epigallocatechin gallate (negativní režim).
• Epicatechin gallate (negativní režim).

Identifikace byla podpořena porovnáním m/z signálů s literárními daty. Spektra produktových iontů potvrdila strukturní charakteristiky jednotlivých sloučenin.

Přínosy a praktické využití metody

Vyvinutá UHPLC-MS/MS metoda umožňuje selektivní, rychlou a citlivou analýzu katechinů a souvisejících fytoantioxidantů v ovoci. Postup lze využít pro standardizaci extraktů, kontrolu kvality surovin v potravinářství nebo farmaceutickém průmyslu a pro výzkum nových přírodních látek.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření použití vysoce výkonných kapalinových chromatografií spojených s vysokým rozlišením hmotnostní spektrometrie pro komplexní metabolomické studie. Dále se předpokládá automatizace SPE procesů, on-line screening antioxidační aktivity a aplikace podobných přístupů na další exotické či dosud nevyužité plodiny.

Závěr

Studie potvrdila, že nezralé plody Manilkara zapota představují bohatý zdroj katechinových antioxidantů. Navržená UHPLC-MS/MS metoda poskytuje spolehlivé a reprodukovatelné výsledky pro další rozvoj potravinářských a farmaceutických surovin.

Reference

1 Shui G, Wong SP, Leong LP. Characterization of antioxidants and change of antioxidant levels during storage of Manilkara zapota L. J Agric Food Chem. 2004;52(26):7834–7841.
2 Giusti MM, Griffin D, Wrolstad RE. Electrospray and tandem mass spectroscopy as tools for anthocyanin characterization. J Agric Food Chem. 1999;47:4657–4664.