Determination of 68 Veterinary Drugs in Marine Products by Ultra High Performance Liquid Chromatography/Triple Quadrupole Mass Spectrometry

Význam tématu

Veterinární léčiva se široce využívají při chovu mořských organismů. Rezidua těchto látek v rybách a dalších mořských produktech však mohou představovat riziko pro lidské zdraví. Regulace limitů zbytkových látek se proto zpřísňuje a vyvstává potřeba rychlých, citlivých a selektivních analytických metod schopných detekovat desítky účinných složek současně.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo vyvinout a validovat metodiku pro simultánní stanovení 68 veterinárních léčiv ze 12 skupin v mořských produktech pomocí ultra vysokotlaké kapalinové chromatografie spojené s trojčinným kvadrupólovým hmotnostním spektrometrem (UHPLC–MS/MS). Autoři představují celý analytický postup od přípravy vzorku až po kvantifikaci a posouzení výkonnosti metody.

Použitá metodika a instrumentace

Pro přípravu vzorku byly použity tyto kroky:

• Extrahce s acetonitrilem, centrifugace, odpaření, doplnění objemu a filtrace.
• UHPLC systém Shimadzu Nexera s pumpami LC-30AD, odplyňovačem DGU-30A3, termostatovanou kolonkou CTO-30A a autosamplerem SIL-30AC.
• Kolona Shim-pack XR-ODSIII (50 mm × 2,0 mm, 1,6 μm), teplota 40 °C, průtok 0,4 mL/min, gradientní eluce s mobilními fázemi 0,1 % kyseliny mravenčí a acetonitrilem, objem injekce 10 μL.
• MS/MS detektor Shimadzu LCMS-8040 s ESI ionizací ve dvojí polaritě (+4,5 kV / –3,5 kV), rychlé spínání polarity 15 ms, skenovací rychlost 15 000 u/s, průtoky plynů a teploty nastaveny pro optimální rozklad iontů.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda prokázala excelentní lineární vztahy (korelační koeficienty > 0,998) v rozsahu 1–200 μg/L na příkladu sulfonamidů. Reprodukovatelnost (n = 6) vykázala %RSD retenčních časů pod 0,9 % a ploch chromatografických piků pod 5 %. Obnovitelnost (recovery) pro 52 testovaných látek se pohybovala v rozmezí 74–120 %, podle typu sloučeniny a matrix vzorku.

Přínosy a praktické využití metody

• Současné stanovení rozsáhlého spektra la terárních léčiv v jednom běhu.
• Vyšší selektivita a citlivost díky MRM režimu trojčinného kvadrupólu.
• Rychlá analýza, zkrácený cyklus přípravy vzorku a chromatografie.
• Vhodné pro rutinní kontrolu kvality, monitorování trhu a odhalování nelegálního použití farmak.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další směřování zahrnuje rozšíření spektra cílových sloučenin o nové látky a metabolity, integraci s automatizovanými systémy přípravy vzorků a zavádění HRMS pro potvrzovací analýzy. Postup může být adaptován na jiné matrice (mořské řasy, měkkýši) a sloužit při environmentální monitoraci.

Závěr

Vyvinutá UHPLC–MS/MS metoda umožňuje spolehlivou, citlivou a rychlou detekci 68 veterinárních léčiv v mořských produktech. Poskytuje dostatečnou opakovatelnost, linearitu i obnovitelnost a je vhodná pro rutinní i výzkumné aplikace v oblasti potravinové bezpečnosti.

Reference

1. Shen L., Yao J., Lin C. a kol. Determination of 68 Veterinary Drugs in Marine Products by Ultra High Performance Liquid Chromatography/Triple Quadrupole Mass Spectrometry. Shimadzu Global COE, Shimadzu (China) Co., Ltd., WP-368, First Edition June 2013.