Monitoring Cell Culture Media for Amino Acids Using an ACQUITY UPLC H-Class PLUS System

Význam tématu

Aminokyseliny jsou nepostradatelnými složkami buněčných médií a hrají klíčovou roli v syntéze proteinů a růstu buněk. Přesné sledování jejich koncentrace je zásadní pro optimalizaci biotechnologických procesů a výrobu vysoce kvalitních bioproduktů.

Cíle a přehled studie

Cílem této studie bylo předvést vynikající chromatografické schopnosti systému ACQUITY UPLC H-Class PLUS s UV detekcí při monitorování běžných aminokyselin v médiu pro kultivaci buněk. Studie zahrnovala separaci derivatizované směsi aminokyselin, měření opakovatelnosti retencí a ploch píků a srovnání s předchozím modelem H-Class.

Použitá metodika a instrumentace

• Předkolonní derivatizace AccQ•Tag Ultra.
• Kolona AccQ•Tag Ultra 1,7 µm, 2,1 × 100 mm.
• Mobilní fáze: AccQ•Tag Eluenty A a B, naředěné vodou.
• UV detekce při 260 nm, systém ACQUITY UPLC H-Class PLUS, Empower software.

Hlavní výsledky a diskuse

Byla dosažena plná separace všech analyzovaných aminokyselin během 8 minut s výborným rozlišením i pro strukturně podobné sloučeniny. %RSD retencí a ploch píků z 10 opakovaných injekcí potvrdilo vysokou reprodukovatelnost a přesnost, srovnatelnou či lepší oproti předchozímu systému.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlá a přesná analýza komplexních směsí aminokyselin.
• Spolehlivé sledování složení média v průběhu buněčných kultur.
• Podpora optimalizace živných médií a zajištění kvality v bioprodukci.
• Snadná integrace výsledků do laboratorních informačních systémů.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Automatizace přípravy vzorků a derivatizace pro vyšší propustnost.
• Kombinace s hmotnostní spektrometrií pro rozšíření analýzy.
• Real-time online monitoring (PAT) pro optimalizaci bioreaktorových procesů.
• Vývoj nových derivatizačních činidel pro zvýšenou citlivost a selektivitu.

Závěr

Systém ACQUITY UPLC H-Class PLUS prokázal vynikající chromatografické schopnosti, spolehlivou reprodukovatelnost a přesnou kvantifikaci aminokyselin v médiích pro buněčnou kultivaci, což podporuje jeho využití v biotechnologickém i farmaceutickém průmyslu.

Reference

1. Labome. Cell Culture Media: A Review.
2. Waters. UPLC Amino Acid Analysis Application Solution. Brožura 720001837EN, 2008.
3. Waters. AccQ•Tag Ultra Derivatization Kit Care and Use Manual, 715001331, 2014.