HPLC STANOVENÍ ANDROSTENONU, SKATOLU A INDOLU VE HŘBETNÍM TUKU U PRASAT

Význam tématu

Kančí pach v mase prasat představuje významný problém jak pro výrobce, tak pro spotřebitele. Lipofilní sloučeniny androstenon, skatol a indol se hromadí v tukové tkáni nekastrovaných kanců a způsobují nežádoucí vůni a chuť. Monitorování těchto analytů je klíčové pro zabezpečení kvality masa, ochranu spotřebitelů a splnění budoucích právních norem EU, které zakazují rutinní kastrace kanců bez anestezie.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem publikované práce bylo vyvinout a validovat novou HPLC metodu umožňující spolehlivé stanovení androstenonu, skatolu a indolu v hřbetním tuku prasat. Studie integruje extrakci methanolem, derivatizaci dansylhydrazinem a fluorescenční detekci, aby byla zajištěna dostatečná citlivost a reprodukovatelnost analytického postupu.

Použitá metodika a instrumentace

Pro extrakci tukové tkáně metodou tání byly odebrány vzorky hřbetního tuku 24 hodin po porážce. Analytické stanovení zahrnovalo:

• Derivatizaci pomocí 2% dansylhydrazinu a 14% roztoku BF3 v methanolu
• HPLC se sestavou Jasco: gradientní čerpadla, autosampler, kolonový termostat, fluorescenční detektor a software ChromNAV
• Kolony: Agilent Eclipse XDB C18 pro androstenon a Phenomenex Kinetex C18 pro skatol a indol
• Mobilní fáze: směs THF, acetonitrilu a fosforečnanu sodného s octanem pro androstenon, fosforečnan sodný a methanol pro skatol a indol
• Fluorescenční detekce: ex 346 nm / em 521 nm pro androstenon, ex 285 nm / em 340 nm pro skatol a indol

Hlavní výsledky a diskuse

Kalikrační křivky pro androstenon (0–3,2 µg g–1) a skatol (0–0,6 µg g–1) vykázaly vysokou linearitu (R2 0,9979 a 0,9983). Detekční limity dosáhly 0,24 µg g–1 pro androstenon a 0,03 µg g–1 pro skatol. Validace na pěti reálných vzorcích ukázala nízkou variabilitu výsledků (SD kolem 4 %). Metoda umožnila kvantifikovat analytické složky pod prahem lidského vnímání (<0,5 µg g–1 pro androstenon, <0,2 µg g–1 pro skatol).

Přínosy a praktické využití metody

Modifikovaná HPLC metoda nabízí snadnou aplikaci v rutinních laboratořích potravinářského i veterinárního sektoru. Díky využití vnitřních standardů a fluorescenční detekce poskytuje spolehlivá data pro stanovení kančího pachu v mase. Metoda podporuje dodržování nových legislativních požadavků EU a pomáhá optimalizovat chov nekastrovaných kanců.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Integrace rychlých screeningových technik (biosenzory, spektrometrie) pro předběžné hodnocení kvality masa
• Automatizace přípravy vzorků a derivatizace v rámci plně robotizovaných pracovních postupů
• Rozšíření metody o multiplexní stanovení dalších metabolitů ovlivňujících senzorické vlastnosti masa
• Využití výsledků pro genetický a nutriční management chovu k minimalizaci výskytu kančího pachu

Závěr

Vyvinutá metoda spojuje jednoduchou extrakci tuku, účinnou derivatizaci a citlivou fluorescenční detekci pro spolehlivé stanovení androstenonu, skatolu a indolu v hřbetním tuku prasat. Validace potvrdila přesnost, reprodukovatelnost a dostatečnou citlivost pod úrovněmi lidského vnímání. Metoda je vhodná pro rutinní použití v laboratořích QA/QC a v potravinářském průmyslu.

Reference

1. Aldal I et al Livest Prod Sci 95 121 (2005)
2. Aluwé M et al Meat Sci 82 346 (2009)
3. Bonneau M Meat Sci 49 257 (1998)
4. Brunius C Zamaratskaia G Acta Vet Brno 81 153 (2012)
5. Chen G et al Food Chem 101 439 (2007)
6. Garcia-Regueiro J A Meat Sci 25 307 (1989)
7. Hansen-Møller J J Chromatogr B 661 219 (1994)
8. Haugen J E et al Meat Sci 90 9 (2012)
9. Lundström K et al Animal 3 1497 (2009)
10. Mortensen A B Sørensen S E Proceedings EM Meat Res Workers 394 (1984)