Simultaneous Analysis of Remdesivir and Metabolites in Human Plasma

Význam tématu

Remdesivir je prodrug určený k léčbě onemocnění způsobených RNA viry a jeho sledování v plazmě je klíčové pro farmakokinetické studie a monitorování terapie.

Cíle a přehled studie

Vyvinout vysoce selektivní a citlivou LC-MS/MS metodu pro simultánní stanovení remdesiviru a jeho hlavního metabolitu GS-441524 v lidské plazmě.

Použitá metodika a instrumentace

Metoda spočívá v ultra UHPLC-MS/MS s multiple reaction monitoring (MRM).
Analytický systém:

• UHPLC Nexera X2
• Hmotnostní spektrometr LCMS-8060 s rozhraním Heated ESI
• Kolona Shim-pack Scepter C18-120 (50 × 2.1 mm, 1.9 µm)
• Mobilní fáze A: 0.05 % formiová kyselina ve vodě, B: 0.05 % formiová kyselina v acetonitrilu
• Gradient: 5 % B (0–0.30 min), 30 % (0.35 min), 70 % (1.50 min), 90 % (1.80–2.80 min), 5 % (2.90–4.50 min)
• Průtok 0.4 mL/min, teplota kolony 40 °C, objem injekce 2 µL (společně s 20 µL vody)
• MRM přechody specifické pro analyty a interní standardy [U-Ring-13C6] remdesivir, [13C5] GS-441524

Příprava vzorku:
Vzorek: 50 µL plazmy s 20 µL 75 % IPA, 10 µL ISTD, 100 µL acetonitrilu; srážení proteinů, centrifugace, přenos supernatantu pro analýzu.

Použitá instrumentace

• UHPLC Nexera X2
• MS systém LCMS-8060, rozhraní Heated ESI
• Shim-pack Scepter C18-120 kolona
• Řídicí software pro MRM akvizici

Hlavní výsledky a diskuse

• Lineární kalibrační křivky: remdesivir 100–5000 ng/mL (R2>0.999), GS-441524 5–500 ng/mL (R2>0.999)
• Přesnost %RSD: remdesivir 0.8–1.8 %, GS-441524 2.2–5.0 %
• Správnost: remdesivir 92–107 %, GS-441524 95–106 %
• Robustnost: 100 injekcí, %RSD 2.2–3.9 %, stabilní citlivost systému

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje rychlé a selektivní stanovení remdesiviru a jeho metabolitu ve farmakokinetických studiích, vhodné pro vysokoprodukční laboratorní provozy a klinickou farmakologii.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření na další antivirotika a jejich metabolity
• Automatizace přípravy vzorků a vysokopropustné formáty
• Integrace do klinických studií a analýz reálných dat

Závěr

Vyvinutá UHPLC-MS/MS metoda pro simultánní analýzu remdesiviru a GS-441524 v lidské plazmě prokázala vynikající linearitu, citlivost a robustnost, což ji činí vhodnou pro rutinní bioanalytické aplikace.

Reference

• Richard T et al. Remdesivir A Review of Its Discovery and Development Leading to Emergency Use Authorization for Treatment of COVID-19 ACS Cent Sci