Chiral Screening for SFC and UHPLC with the Agilent 1260 Infinity II SFC/UHPLC Hybrid System

Význam tématu

Chirální analýza je klíčová v lékové výrobě, protože enantiomery často vykazují odlišnou biologickou aktivitu a toxicitu. Rychlé a efektivní stanovení chirálních sloučenin ve smíšených racematech umožňuje přesnou kontrolu kvality a zkracuje vývojové cykly farmaceutických látek.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem Application Note je předvést použití hybridního systému Agilent 1260 Infinity II SFC/UHPLC ve spojení s programem Method Scouting Wizard pro rychlý screening a optimalizaci separačních podmínek chirálních sloučenin. Studie porovnává separace racemických směsí ibuprofenu, ketoprofenu, karprofenu a indoprofenu na čtyřech identických chiralních fázích v módu SFC i UHPLC.

Použitá metodika a instrumentace

Systém byl vybaven následujícími moduly:

• Agilent 1260 Infinity II SFC Control Module (G4301A) a SFC Binary Pump (G4782A)
• Agilent 1260 Infinity II Quaternary/Binary UHPLC Pump (G7111B/G7112B)
• Agilent 1260 Infinity II Multisampler (G4767A) a Diode Array Detector s vysokotlakou buňkou (G7115A, G4301-60100)
• Agilent 1290 Infinity II Multicolumn Thermostats (G7116B) se Selector Ventily pro SFC a UHPLC kolony
• InfinityLab Quick Change ventily pro přepínání mezi SFC a UHPLC módy a výběr až 32 kolonií

Software:

• Agilent OpenLab CDS ChemStation Edition Rev. C.01.08
• Method Scouting Wizard Rev. A02.08.011

Hlavní výsledky a diskuse

V SFC módu byl aplikován gradient 10–50 % organického modifieru (metanol, etanol, isopropanol s 0,1 % TEA/TFA) při 2 mL/min a 140 bar. Nejlepší rozlišení racemátů bylo dosaženo na koloniích Poroshell 120 Chiral-T a Chiral-CD s metanolem jako modifierem. Celkový screening čtyř sloučenin na čtyřech kolonách vyžádal ~3,5 h.
V UHPLC módu (30 mM metanol/ammonium formiát pH 4, 0,5 mL/min, izokraticky 30–50 % metanolu) poskytla kolonie Chiral-T při 40 % metanolu nejlepší kompromis mezi rozlišením a dobou analýzy. Další snížení teploty ze 30 °C na 20 °C vedlo k mírnému zlepšení separace ibuprofenu.

Přínosy a praktické využití metody

• Výměna mezi SFC a UHPLC bez fyzické přestavby systému
• Centralizované softwarové řízení všech kolonií a solventů
• Úspora času a nákladů při vývoji analytických metod
• Možnost vysokopropustného provozu až 32 kolonií v jednom workflow

Budoucí trendy a možnosti využití

Hybridní přístroje s integrovaným SFC a UHPLC se budou uplatňovat v rychlém vývoji metod pro nové chirální sloučeniny a v online QA/QC procesech. Dalším trendem je automatizace chiralního screeningového procesu a integrace umělé inteligence pro návrh optimálních podmínek.

Závěr

Hybridní systém Agilent 1260 Infinity II SFC/UHPLC v kombinaci s Method Scouting Wizard umožňuje efektivní screening a optimalizaci chirálních separací v jednom přístroji. Uvedený přístup přináší významné zrychlení a zjednodušení vývoje analytických metod pro farmaceutické racemáty.

Reference

1. Orthogonal Separations Using the Agilent 1260 Infinity II SFC/UHPLC Hybrid System; Agilent Technologies Technical Overview; publication number 5991-8276EN.
2. Chiral Multicolumn Method Development on the Agilent 1260 Infinity II Analytical SFC System; Agilent Technologies Application Note; publication number 5991-7624EN.
3. Easy Access to Rapid Chiral SFC Method Development for NonChromatographers; Agilent Technologies Application Note; publication number 5994-0011EN.