Method for multiple COVID-19 drugs analysis by LC-MS/MS

Význam tématu

V době pandemie COVID-19 vzrostl zájem o rychlou a spolehlivou analýzu antivirotik a podpůrných léčiv pro terapeutické i výzkumné účely. Kvantifikace primárních i metabolických forem těchto látek v biologických matricích je klíčová pro sledování farmakokinetiky, dávkování a bezpečnosti léčby.

Cíle a přehled studie

Cílem publikovaného protokolu bylo vyvinout robustní LC-MS/MS metodu využívající stabilně značené vnitřní standardy pro simultánní kvantifikaci devíti klíčových antivirotik a podpůrných léčiv spojených s léčbou COVID-19. Metoda je optimalizována pro výzkumné účely, nikoli diagnostiku.

Použitá metodika a instrumentace

Pro separaci byla použita vysokotlaká kapalinová chromatografie s gradientním eluačním programem (tabulka gradientu v textu). Detekce probíhala na trojitém kvadrupólovém hmotnostním spektrometru v režimu MRM (Multiple Reaction Monitoring).

• Mobilní fáze: voda a acetonitril s aditivy (podrobnosti viz gradient).
• Kolona: reverzní fáze C18, teplota kolony optimalizovaná v protokolu.
• Ionizace: pozitivní ESI.
• MRM přechody pro analyty i odpovídající stabilně značené standardy (13C, 15N, 2H označení).

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda vykazovala lineární odezvu v širokých koncentračních rozmezích (zpravidla 50–2000 ng/mL pro většinu sloučenin, u některých až 10000 ng/mL). Koeficient variační (CV) ve všech bodech kalibrační křivky byl pod 11 % a odchylky naměřených koncentrací od nominálních hodnot nepřekročily ±10 %. To potvrzuje dostatečnou přesnost i opakovatelnost metody pro bioanalytické aplikace.

Přínosy a praktické využití metody

Simultánní stanovení několika antivirotik šetří čas a materiál v laboratorním provozu. Využití stabilně značených vnitřních standardů zajišťuje korekci matrice a instrumentálních výkyvů. Metoda je vhodná pro farmakokinetické studie, monitorování terapeutických hladin a preklinický výzkum nových léčiv.

Budoucí trendy a možnosti využití

Rozšíření panelu sledovaných sloučenin o nové deriváty a metabolity, adaptace pro další biologické matrice (tkáň, cerebrospinální mok) či přechod na vysokorychlostní UHPLC-MS/MS platformy může zvýšit citlivost a propustnost analýz. Integrace dat s farmakometrickými modely podpoří personalizované dávkování.

Závěr

Popsaná LC-MS/MS metoda s využitím stabilně značených interních standardů nabízí spolehlivou, citlivou a přesnou analýzu klíčových antivirotik a podpůrných léčiv souvisejících s COVID-19. Díky širokému kalibračnímu rozsahu a nízké variabilitě je vhodná pro výzkumné i preklinické aplikace.

Reference

• Alsachim. COVID-19 Stable isotope-labeled Method for multiple COVID-19 drugs analysis by LC-MS/MS. Application Note ALC-5ENCD58, 2020.