Supporting Bioprocess Development and Method Transfer using Multi Attribute Monitoring Methods

Význam tématu

Multi-attribute monitoring (MAM) představuje moderní přístup k řízení kvality biotherapeutik, kdy pomocí LC-MS detekce sledujeme zároveň více kritických atributů. Tento přístup podporuje zásady Quality by Design (QbD) a umožňuje konsolidaci tradičně oddělených testů, čímž se zvyšuje efektivita laboratoří a kvalita dat.

Cíle a přehled studie

Hlavním cílem bylo demonstrovat nasaditelný, regulacím vyhovující pracovní postup založený na LC–MS pro semi-cílené sledování kvalitativních atributů (P(C)QA) bioterapeutických proteinů. Studie simulovala procesní prostředí, kde bylo nutné ve vysoké frekvenci analyzovat velká množství vzorků a integrovat vývojové i QC testování na jediné platformě.

Použitá metodika a instrumentace

Pro metodu byl zvolen systém ACQUITY QDa spojený s kapalinovou chromatografií ACQUITY a softwarovým prostředím Empower.

• SIR (Selected Ion Recording) v staggered režimu pro zvýšení citlivosti a selektivity.
• Gradientní separace trvající 50 minut pro dostatečný rozlišení kritických párů peptidů.
• Vyhodnocení variability (%CV) jako metriky pro detekci náhodných a systematických odchylek.

Hlavní výsledky a diskuse

Implementace SIR kanálů umožnila cílené sledování modifikovaných forem peptidů (oxidace, deamidace, glykozylace, odštěpení C-konce). Díky pečlivému naprogramování kanálů přes Empowerské ovládací rozhraní bylo dosaženo:

• Vyšší citlivosti v důsledku prodlouženého dwell time na důležité ionty.
• Rychlejšího běhu metody (50 minut) s dostatečným rozlišením klíčových kritických párů (např. oxidovaný T41 vs. deamidovaný T37).
• Spolehlivého sledování variability výsledků pomocí souhrnných grafů pro rychlou identifikaci problémů s procesem či instrumentem.

Přínosy a praktické využití metody

Workflow nabízí:

• Zvýšenou produktivitu díky jednomu běhu sledujícímu více atributů.
• Urychlené rozhodování během vývoje procesů.
• Snadné nasazení v ne-regulovaných i regulovaných prostředích.
• Jednoduché přenášení metod mezi laboratořemi a etapami životního cyklu produktu.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další integrace plně vysokorozlišovací MS pro rozšíření počtu monitorovaných atributů, automatizace datové analýzy s prvky umělé inteligence a cloudových řešení pro centralizovanou správu dat. Také je pravděpodobný nárůst throughputu a rozvoj robustních systémů pro online monitoring bioprocestů.

Závěr

Popsaný case study potvrzuje, že kombinace ACQUITY QDa a Empower CDS umožňuje škálovatelné, compliance-ready řešení pro MAM-based workflows. Metoda zvyšuje efektivitu laboratoře, usnadňuje rozhodování a zajišťuje konzistentní kvalitu během vývoje i rutinní kontroly biotherapeutik.

Reference

V textu nebyly uvedeny specifické literární zdroje.