PROFILING OF CARBOHYDRATES IN HONEY BY HILIC-MS

Význam tématu

Med je komplexní směs sacharidů a snadno se falšuje přidáním sirupů. Detailní profilace mono-, di- a trisacharidů umožňuje ověřit autentičnost, kvalitu a původ medu.

Cíle a přehled studie

Studie zkoumá upravenou HILIC-MS metodu pro rychlou separaci a kvantifikaci sacharidů v medu a sirupech. Monitoruje více než 25 běžných sacharidů, včetně fruktózy, glukózy a sacharózy, a zkoumá různé botanické a geografické vzorky.

Použitá metodika a instrumentace

• Příprava standardů: směsi sacharidů při koncentracích 1–200 μg/mL s vnitřním standardem (13C označené fruktóza, glukóza, sacharóza).


• Příprava vzorků: 50 mg/mL ve vodno-acetonitrilovém elučním pufru, filtrace 0,2 μm, ředění 1:5 a 1:500.


• Chromatografie: HILIC kolona XBridge BEH Amide XP (3×100 mm, 2,5 μm), gradient 20–22 % vodné fáze, teplota 30 °C, tok 0,8 mL/min, runtime 25 min.


• Detekce MS: ACQUITY QDa v režimu ESI s detekcí [M+Cl]−, SIR kanály pro mono- (m/z 215), di- (m/z 377) a tri- (m/z 539) sacharidy.

Hlavní výsledky a diskuse

• Metoda dokáže dobře rozlišit mono-, di- a tri-sacharidy se stabilní návratností a přesností (RSD < 5 %).


• Profilace 5 medů a 3 sirupů ukázala výrazné rozdíly v obsahu disacharidů a trisacharidů mezi skupinami.


• Květnová složení (např. jetelový med) vykazuje unikátní disacharidový vzorec oproti smíšeným severoamerickým medům.


• Kvantifikace fruktózy, glukózy a sacharózy s LOQ kolem 0,02 % a přesností ~90–95 % spolehlivě hodnotí kvalitu medu dle Codex Alimentarius.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlá a citlivá analýza více sacharidů z jednoho vzorku.


• Schopnost detekovat neznámé sacharidové složky a identifikovat falšování.


• Rozlišení botanického a geografického původu medu na základě unikátního sacharidového profilu.


• Využití v QA/QC laboratořích potravinářského průmyslu pro validaci kvality medu.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření metodiky o vyšší sacharidové oligomery a modifikované cukry.


• Integrace s vícečetnou selektivní detekcí (MRM) pro vylepšenou selektivitu.


• Validace pro další potravinářské produkty napadené falšováním.


• Databáze charakteristických profilů pro různé odrůdy a oblasti původu.

Závěr

Upravená HILIC-MS metoda poskytuje spolehlivou, citlivou a rychlou profilaci a kvantifikaci sacharidů v medu. Umožňuje odhalit falšování, rozlišit původ a poskytnout důležité informace pro kontrolu kvality a výzkum.

Reference

• Doner LW. The sugars of honey – a review. J Sci Food Agric. 1977;28:443–456.


• Codex Alimentarius Commission. Revised Codex Standard for honey. Codex STAN 12-1981, Rev.2; 2001.


• Da Costa Leite JM, et al. Determination of oligosaccharides in Brazilian honeys of different botanical origin. Food Chem. 2000;70:93–98.


• Yang J, Rainville P, Liu K, Pointer B. Quantification of Mono and Disaccharides in Foods. Waters Application Note 720006575en; 2019.