Analysis of Prazosin in Serum

Význam tématu

Seriová analýza prazosinu je důležitá pro sledování terapeutických hladin u pacientů léčených alfa-1-blokátory a zároveň pro prevenci možné zneužití léku. Precizní a rychlá metoda kvantifikace v malém objemu vzorku podporuje klinické studie a rutinní kontrolu kvality.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo vyvinout přímý, rychlý a citlivý analytický postup pro stanovení prazosinu v lidském séru. Studie využívá on-line přípravu a koncentrování vzorku s následným kapalinově chromatografickým dělením na cyanoživotném fázovém sloupci.

Použitá metodika a instrumentace

On-line extrakce pomocí techniky přepínání kolonek spojena s chromatografickým systémem Agilent vybaveným:

• Kolonou ZORBAX SB-CN (4,6 × 150 mm, 5 μm) s ochrannou kolonou
• Mobilní fází: 35 % acetonitril a 2 mM octanasulfonátu sodného v 116 mM fosfátovém pufru, pH 2,8
• Průtok 1,0 mL/min
• Fluorescenční detekcí (excitační vlnová délka 340 nm, emisní 385 nm)

Hlavní výsledky a diskuse

Po on-line extrakci z pouhých 50 μL séra bylo dosaženo vysoce reprodukovatelné separace prazosinu s charakteristickým ostrým píkem. Metoda ukázala dobrou retenci i na kolonách stabilních při nízkém pH. Naměřená koncentrace standardu prazosinu činila 23 ng/μL.

Přínosy a praktické využití metody

• Minimalizace objemu biologického vzorku
• Rychlá a přímá analýza bez nutnosti složitých offline postupů
• Vysoká citlivost díky fluorescenční detekci
• Stabilní výkon kolony při nízkém pH

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj může směřovat k miniaturizaci on-line přípravy, automatizaci vyššího počtu vzorků a kombinaci s hmotnostní spektrometrií pro ještě vyšší selektivitu. Možné je také rozšíření metody na multiplexní stanovení dalších farmak ve směsi.

Závěr

Popsaná on-line kapalinová chromatografie s fluorescence nabízí efektivní a citlivý nástroj pro stanovení prazosinu v séru. Metoda je vhodná pro klinický výzkum i rutinní laboratoře zaměřené na monitorování léčiv.

Reference

1. Ricker R. Analysis of Prazosin in Serum. Agilent Technologies Application Note 5988-6400EN, 2002.