Determination of Benzimidazole Residues in Animal Tissue by Ultra High Performance Liquid Chromatography Tandem Mass Spectrometry

Význam tématu

Monitorování reziduí benzimidazolových anthelmintik v živočišných tkáních je klíčové pro ochranu zdraví spotřebitelů a dodržování legislativních limitů. I přes vysokou účinnost a nízkou toxicitu mají některé benzimidazoly a jejich metabolity genotoxicitu a teratogenitu, což vyžaduje citlivé analytické metody pro jejich detekci a kvantifikaci.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo vyvinout a validovat rychlou, citlivou a spolehlivou UHPLC-ESI-MS/MS metodu pro simultánní stanovení 16 reziduí benzimidazolů v živočišných tkáních. Metoda měla splňovat požadavky rutinního sledování veterinárních léčiv v potravinách.

Použitá metodika a instrumentace

Pro přípravu vzorků byly živočišné tkáně extrahovány směsí ethylacetát/50 % KOH/1 % BHT, odmaštěny n-hexanem a očištěny na MCX SPE kartridžích. Separace probíhala na UHPLC systému Shimadzu Nexera se sloupcem Shim-pack XR-ODS III při 30 °C a průtoku 0,4 mL/min. Detekce byla realizována na triple quadrupole masovém spektrometru Shimadzu LCMS-8040 v pozitivním režimu s ESI rozhraním a MRM módem.

Hlavní výsledky a diskuse

• Kalibrační křivky pro 16 analyzovaných benzimidazolů v rozsahu 0,5–50 ng/mL vykázaly vynikající linearitu (R² 0,9993–0,9999).
• Limity detekce (LOD) se pohybovaly mezi 1 a 2,2 µg/kg.
• Opakovatelnost stanovení (%RSD) pro retenční čas i plochu píku byla lepší než 5 % při třech úrovních koncentrace (0,5; 5; 50 ng/mL).
• Recovery testy ve vzorcích vepřového masa při spikingové úrovni 10 µg/kg dosáhly 80,9–118,5 %.

Přínosy a praktické využití metody

• Umožňuje simultánní sledování širokého spektra benzimidazolů a jejich klíčových metabolitů v potravinářských vzorcích.
• Splňuje požadavky na citlivost a reprodukovatelnost v oblasti QA/QC a regulačních kontrol.
• Podporuje rutinní laboratorní provoz díky rychlé analýze a minimálnímu objemu vzorku.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření panelu analyzovaných látek včetně nových metabolitů a derivátů.
• Automatizace přípravy vzorků a integrace s on-line SPE systémy.
• Využití vysokorozlišovací hmotnostní spektrometrie (HRMS) pro screening neznámých či neočekávaných reziduí.

Závěr

Vyvinutá UHPLC-ESI-MS/MS metoda pro stanovení 16 benzimidazolů v živočišných tkáních prokázala vysokou citlivost, linearitu, přesnost i opakovatelnost. Splňuje nároky pro monitoring veterinárních léčiv a zajištění bezpečnosti potravin.