The Potency Determination of 15 Cannabinoids using the Hemp Analyzer

Význam tématu

Rychlá a přesná kvantifikace hlavních kanabinoidů je klíčová pro zajištění kvality a bezpečnosti průmyslového konopí a produktů z něj. Obor kontinuálně roste, a to jak ve farmaceutické aplikaci, tak ve spotřební kosmetice či potravinářství. Chromatografické metody s vysokou citlivostí umožňují spolehlivé stanovení účinných látek a podporují průmyslové i klinické zkoumání jejich účinků.

Cíle a přehled studie / článku

Tento dokument popisuje vývoj, optimalizaci a validaci metody na stanovení 15 kanabinoidů pomocí Shimadzu Hemp Analyzer, integrovaného HPLC systému s UV-Vis detekcí. Studie cíleně hodnotí linearitu, opakovatelnost, limity detekce a kvantifikace a přesnost metody včetně tří úrovní QC standardů.

Použitá metodika

Pro přípravu vzorku byl použit kalibrační roztok s koncentracemi 0,5–100 µg/mL a QC standardy na úrovních 2,5; 25; 75 µg/mL. Kanabinoidy pocházely z certifikovaných CRM a jednotlivých standardů. Pro výpočet limitů detekce (LOD) a kvantifikace (LOQ) byla aplikována ASTM metoda na základě poměru signálu k šumu (LOD = S/N 3, LOQ = S/N 10).

Použitá instrumentace

• Systém: Shimadzu Hemp Analyzer (HPLC s integrovaným UV-Vis detektorem).
• Detekce: 220 nm, UV-Vis detektor.
• Kolona: NexLeaf CBX 4.6×150 mm, 2.7 µm, s ochranou kolony CBXGuard.
• Mobilní fáze A: 0,085 % kyselina fosforečná ve vodě; B: 0,085 % kyselina fosforečná v acetonitrilu.
• Gradient: 70 % B (3 min) → 85 % B (6,01 min) → 95 % B (0,99 min) → návrat na 70 % B (0,01 min) → 4,99 min stabilizace.
• Průtok: 1,6 mL/min; teplota kolony: 35 °C; objem injekce: 5 µL.

Hlavní výsledky a diskuse

Kalibrační křivky všech 15 kanabinoidů vykázaly výbornou linearitu s koeficientem R2 ≥ 0,999 (váhová metoda 1/C). Opakovatelnost retence i plochy vrcholu byla potvrzena sedmičetnými injekcemi. Úrovně přesnosti QC standardů se pohybovaly mezi 98 a 108 % při RSD do 5 %. Limity detekce se pohybují mezi 0,10–0,23 µg/mL a kvantifikace mezi 0,31–0,70 µg/mL. Ukázkové chromatogramy QC vzorků i sedmičetný overlay potvrdily vysokou rozlišovací schopnost a stabilitu metody.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí robustní a kvantitativně přesné stanovení hlavních kanabinoidů v široké škále konopných matric. Lze ji využít pro QA/QC v průmyslové výrobě, regulační testování i klinické studie, kde je klíčová spolehlivost a opakovatelnost výsledků.

Budoucí trendy a možnosti využití

Rozšíření metody na více než 15 kanabinoidů s využitím UHPLC a hmotnostní detekce by mohlo zvýšit přesnost a zkrátit analýzu. Další možnosti představují automatizované přípravné stanice, zelené chromatografické rozpouštědla a aplikace pro vysokoprůchodovou analýzu v reálném čase.

Závěr

Vyvinutá HPLC metoda na Shimadzu Hemp Analyzer pro kvantifikaci 15 kanabinoidů prokázala vynikající linearitu, přesnost, opakovatelnost a citlivost. Je vhodná pro průmyslové i výzkumné aplikace v oblasti kvality konopných produktů.

Reference

• Grand View Research. Global Industrial Hemp Market report, 2020.
• Armbruster DA, Tillman MD, Hubbs LM. Limit of detection (LOD)/limit of quantitation (LOQ): comparison of the empirical and statistical methods exemplified with GC-MS assays of abused drugs. Clinical Chemistry. 1994;40(1):1233–1238.
• Shrivastava A, Gupta VB. Methods for the determination of limit of detection and limit of quantitation of analytical methods. Review Article. 2011;2(1):21–25.