Robustness characterization of a quantitative whole blood assay using PaperSpray technology for clinical research

Význam tématu

PaperSpray MS je inovativní technika pro rychlou analýzu komplexních vzorků, která eliminuje potřebu složité přípravy a separace. V klinickém výzkumu umožňuje vysokou propustnost a udržení citlivosti, což je zásadní pro farmakokinetické studie a monitoring léčiv.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo ověřit robustnost kvantitativní metody pro stanovení metabolitu opioidu EDDP v lidské plné krvi bez předchozího čištění nebo ředění. Studie testovala konzistenci citlivosti, přesnosti a opakovatelnosti přes 480 po sobě jdoucích analýz v systému Thermo Scientific VeriSpray s TSQ Quantis.

Použitá metodika a instrumentace

Přehled postupu:

• Příprava vzorků: 8 µL plné krve obohacené o EDDP v koncentracích 1,75–500 ng/mL a QC vzorků (50, 100, 200 ng/mL).
• Nanášení: Vzorky se sušily na papírových proužcích, poté se dvoufázově znovu navlhčovaly a ionizovaly.
• MS konfigurace: Thermo Scientific TSQ Quantis, triple kvadrupól; VeriSpray PaperSpray ion source; TraceFinder 4.1 pro sběr dat.
• Parametry: rozpouštědlo methanol/voda 95/5 s 0,01 % kyseliny octové, napětí 3,8 kV, Q1/Q3 rozlišení 0,7/1,2 Da, CID plyn 2 mTorr, teplota 350 °C.

Hlavní výsledky a diskuse

Stanovený LLOQ dosáhl 3,5 ng/mL s přesností ±4,1 % a RSD 2,6 %. Čtyři kalibrační křivky vykázaly konzistentní výsledky (RSD <4 %, přesnost <4 %). Robustnost se potvrdila při 480 analýzách: QC vzorek 50 ng/mL vykázal celkovou RSD 1,4 %. Jednoduché čištění iontové sondy mezi magazíny bylo dostačující k zachování výkonu.

Přínosy a praktické využití metody

• Možnost analýzy až 480 vzorků bez manuální přípravy.
• Rychlý čas analýzy (<1 minuta na vzorek) a minimalizace rizika kontaminace.
• Vhodné pro klinické farmakokinetické studie a monitoring metabolitů v plné krvi.

Budoucí trendy a možnosti využití

Rozšíření PaperSpray MS do dalších bioanalytických oblastí, automatizace přípravy a vývoj nových nosičů papíru pro zlepšení citlivosti. Potenciál kombinace s dalšími MS platformami a víceanalyzátorovými protokoly.

Závěr

VeriSpray PaperSpray ion source s TSQ Quantis nabízí spolehlivou, rychlou a robustní metodu pro kvantifikaci EDDP v plné krvi bez nutnosti předúpravy vzorku. Metoda udržuje vysokou přesnost a opakovatelnost i při stovkách měření bez zásahu obsluhy.

Reference

1. Wang H.; Liu J.; Cooks R. G.; Ouyang Z. Paper Spray for Direct Analysis of Complex Mixtures Using Mass Spectrometry. Angew. Chem. Int. Ed. 2010, 49, 877–880.