HPLC, LC/MS Columns Inertsil Hybrid-C18

Význam tématu

Silika-based C18 kolonky s hybridní organicko-anorganickou vazbou přinášejí v analytické chemii robustní řešení pro separace v širokém pH rozsahu. Stabilita za kyselých i zásaditých podmínek je klíčová pro reprodukovatelné výsledky a dlouhou životnost kolon, což zjednodušuje rutinní analýzy i náročné LC/MS aplikace.

Cíle a přehled studie

Hlavním cílem bylo vyvinout a charakterizovat HPLC kolonu Inertsil Hybrid-C18 odolnou v pH 1–12, ověřit její výkonnost, stabilitu a reprodukovatelnost mezi různými výrobními šaržemi a demonstrovat její využití na reprezentativních farmaceutických vzorcích.

Použitá metodika a instrumentace

Lančení testů probíhalo na vysokotlakých HPLC systémech kompatibilních s LC/MS a UV detekcí. Klíčové parametry:

• Kolony: Inertsil Hybrid-C18 (1,7 µm, 3,5 µm, 5 µm; rozměry 50–250×2,1/3,0/4,6 mm)
• Mobilní fáze: výměny kyselých (0,1% HCOOH, 10 mM HCOONH4) a zásaditých (50 mM NH3) pufrů ve směsích s acetonitrilem
• Pracovní teploty: 40–50 °C, průtoky 0,2–2,0 mL/min
• Detekce: UV 210–310 nm, LC/MS kompatibilní eluenty
• Test odolnosti: pH 11,5 fosfátový pufr/acetonitril, dlouhodobý provoz při 0,2 mL/min

Hlavní výsledky a diskuse

Kolona udržela vysoký počet teorií desek i po expozici zásadité mobilní fázi, což potvrzuje hybridní silikové jádro. Mezi šaržemi byly prakticky identické retenční časy a tvary píků, což dokládá vynikající reprodukovatelnost. Studie na skupinách látek ukázaly:

• Podstatné ovlivnění selektivity pH mobilní fáze pro zásadité a kyselé látky podle jejich pKa
• Výborné symetrické tvary píků u metalově koordinujících sloučenin bez výrazných artefaktů adsorpce
• Dlouhodobá stabilita pod pH 11,5 bez ztráty účinnosti

Přínosy a praktické využití metody

Inertsil Hybrid-C18 nabízí laboratorním i průmyslovým provozům:

• Univerzální kolonku pro farmaceutické testy (antivirotika, antibiotika, antihistaminika, antidepresiva)
• Kompatibilitu s LC/MS a citlivými biologickými aplikacemi díky bioinertnímu PEEK i nerezavějícímu provedení
• Snížení nákladů na opakované revalidace díky jednotnému výkonu mezi šaržemi

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření do preparativních rozměrů, adaptace na vysokoteplotní separace a automatizované metody včetně hyphenovaných systémů (UHPLC–MS/MS). Další vývoj se zaměří na vylepšení bioinertních povrchů a modulární systémy pro online či offline vakcinační a metabolomické aplikace.

Závěr

Inertsil Hybrid-C18 představuje inovativní HPLC kolonu s širokým pH rozsahem, výjimečnou odolností a reprodukovatelností, ideální pro všestranné analytické úlohy od rutinní kontroly kvality po náročné farmaceutické a biofarmaceutické aplikace.