Development of a Simultaneous Analysis Method for Allergens in Food Using a Triple Quadrupole Mass Spectrometer

Význam tématu

Detekce alergenních bílkovin v potravinách je klíčová pro ochranu zdraví spotřebitelů a dodržování přísných potravinářských předpisů. Tradiční metody jako ELISA a PCR mají omezení v přesnosti a multiplexní analýze. Hladinová kapalinová chromatografie v kombinaci s hmotnostní spektrometrií nabízí vysokou selektivitu i citlivost a umožňuje zároveň sledování více alergenů.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem bylo vyvinout a ověřit simultánní analytickou metodu pro sedm povinně deklarovaných potravinových alergenů (pšenice, pohanka, vejce, mléko, arašídy, krevety, krab) a sóju jako ekvivalentní alergen. Metoda využívá kapalinovou chromatografii Nexera TM X3 spojenou s triple kvadrupólem LCMS-8060NX.

Použitá metodika a instrumentace

Extrahovaná bílkovinná frakce ze standardních i komerčních vzorků (kari, kojenecká výživa, nudle udon) byla podrobena:

• reduktaci a alkylaci
• trypsinové digesci
• purifikaci na SPE kolonkách
• analýze LC-MS/MS v režimu MRM (48 přechodů, 17 peptidových typů)

Klíčová instrumentace:

• Kapalinový chromatograf Nexera TM X3
• Mass spektrometr LCMS-8060NX (triple kvadrupól)

Podmínky HPLC a MS byly optimalizovány pro rychlou separaci do 10,5 min a vyvážený tvar špiček.

Hlavní výsledky a diskuse

Všechny stanovené peptidy elutovaly během 10,5 min s ostrými a dobře rozlišenými vrcholy. Na modelovém peptidu AGGLTLER z korýšů byla prokázána lineární odezva v rozsahu 0,1–50 ppm. Aplikace na reálné potravinové vzorky ukázala:

• Žádné detekované alergenní peptidy ve vzorcích kari a kojenecké výživy
• Přítomnost pšeničných peptidů v nudlích udon v souladu s deklarací na obalu

Výsledky potvrdily spolehlivost a přesnost metody v různých matricích.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje simultánní kvantifikaci více alergenů v jediném analytickém běhu, snižuje riziko falešně pozitivních výsledků a zvyšuje laboratořní efektivitu. Je vhodná pro kontrolu kvality potravin, emise analýz v rámci QA/QC a zajištění souladu s legislativními normami.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření panelu sledovaných alergenů
• Automatizace přípravy vzorků pro vysokopropustné analýzy
• Integrace datového zpracování s AI pro rychlou interpretaci výsledků
• Standardizace metodiky mezi laboratořemi a akreditace pro diagnostické aplikace

Závěr

Vyvinutá LC-MS/MS metoda s triple kvadrupólem pro simultánní stanovení osmi potravinových alergenů prokázala vysokou selektivitu, citlivost a reprodukovatelnost. Metoda je robustní, univerzálně použitelná a přispívá k bezpečnosti potravin.

Reference

Text neobsahuje explicitní seznam literatury.