Sugar Phosphates Using GlycanPac AXH-1

Význam tématu

Stanovení cetylpyridiniového kationtu a jednoduchých cukerných fosfátů v ústních vodách je zásadní pro kontrolu kvality a bezpečnosti farmaceutických a spotřebitelských přípravků. Cetylpyridinium působí jako antiseptikum a cukerné fosfáty mohou ovlivnit účinnost i stabilitu produktu. Přesná a citlivá analýza těchto sloučenin zajišťuje účinnost přípravku a splnění regulačních požadavků.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem představovaného protokolu je vyvinout rychlou, spolehlivou a volatilitě kompatibilní chromatografickou metodu pro současné stanovení cetylpyridiniového kationtu a běžných cukerných fosfátů (fruktóza-6-fosfát, glukóza-1-fosfát, glukóza-6-fosfát) v maticích ústních vod. Studie demonstruje využití isokratického režimu na specifické kolonkách a detekci vhodné pro hromadné využití v QA/QC laboratořích.

Použitá metodika a instrumentace

Chromatografická metoda spočívá v kombinaci aniontové výměnné separace a detekce nabitými aerosolovými částicemi a vodivostní detekce. Hlavní parametry:

• Kolonka: Thermo Scientific Dionex GlycanPac AXH-1 (3,0 µm, 2,1 × 150 mm) ve spojení s Acclaim Surfactant Plus (3,0 µm, 1,9 × 150 mm)
• LC systém: Thermo Scientific Dionex ICS-3000 / UltiMate 3000RS
• Mobilní fáze: A – acetonitril; B – 100 mM amonná forma, pH 3,5; C – voda; isokratické složení 80 % A / 20 % B; průtok 0,5 mL/min; teplota 25 °C
• Injektovaný objem: 2 µL
• Detekce: Charged Aerosol Detector (Corona Veo) s blank subtraction; UV detektor při 220 nm; vodivostní detekce po supresoru CSRS-300 (2 mm)

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda umožnila baseline separaci všech cílových analyzovaných látek během 20 minut. Konduktometrická detekce poskytla citlivé sledování cukerných fosfátů, zatímco nabitý aerosol detektor spolehlivě kvantifikoval cetylpyridinium. Retenční časy hlavních složek:

• Sodný iont (matice) – vrchol 1
• Fruktóza-6-fosfát – vrchol 2
• Glukóza-1-fosfát – vrchol 3
• Glukóza-6-fosfát – vrchol 4
• Cetylpyridinium – vrchol 5

Reprodukabilita retenčních časů i plošného vyhodnocení byla lepší než 2 % RSD. Isokratický režim a volatilitně kompatibilní složení umožňují snadné přepojení na hmotnostní spektrometrie.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí:

• Rychlou analýzu s minimem rušivých zásahů a úprav vzorku
• Vysokou citlivost pro sledování stop cukerných fosfátů i antiseptika
• Kompatibilitu s MS detekcí pro rozšířenou strukturní charakterizaci
• Vhodnost pro rutinní QA/QC kontroly v průmyslových i výzkumných laboratořích

Budoucí trendy a možnosti využití

Další směřování zahrnuje optimalizaci pro LC-MS/MS kvantifikaci v komplexnějších matricích, miniaturizaci kolonek pro vyšší propustnost analýz a integraci on-line vzorkovačů pro automatizované monitorování výrobních procesů. Rovněž je možné rozšířit metodu o další biologicky relevantní sloučeniny, jako jsou nukleotidy či polysacharidy.

Závěr

Popsaná isokratická metoda na bázi aniontové výměnné chromatografie s kombinovanou detekcí nabitým aerosolovým detektorem a konduktometrií poskytuje rychlé, citlivé a spolehlivé stanovení cetylpyridinia a cukerných fosfátů v ústních vodách. Volatilní mobilní fáze usnadňuje přechod na hmotnostní spektrometrie a zajišťuje širokou použitelnost v analytických laboratořích.

Reference

V textu nebyly uvedeny explicitní bibliografické odkazy.