Agilent AdvanceBio Surfactant Profiling HPLC columns

Význam tématu

Aplikace surfaktantů v bioterapeutických formulacích je klíčová pro stabilitu proteinových léčiv. Surfaktanty, jako polysorbaty, zabraňují agregaci a adsorpci proteinů na povrchové rozhraní kapalina–plyn. Jejich degradace však může vést ke snížení účinnosti formulace, vzniku volných mastných kyselin a riziku oxidativního poškození biologické makromolekuly. Monitorování integrity surfaktantů proto významně ovlivňuje kvalitu, životnost a regulační schválení bioléčiv.

Cíle a přehled studie / článku

Hlavním cílem dokumentu je představit novou HPLC kolonu Agilent AdvanceBio Surfactant Profiling, optimalizovanou pro rychlou a komplexní charakterizaci surfaktantů a jejich rozkladných produktů. Studie porovnává tradiční kvantitační metodu surfaktantů na mixed-mode kolóně s pokročilou analýzou degradace pomocí nové kolony. Zahrnuje ukázky rozlišení mono-, di- a triesterů polysorbatu 80, volných mastných kyselin a polyoxyethylenových fragmentů při krátkých doběch analýzy.

Použitá metodika a instrumentace

Pro analýzu byl použit vysokotlaký kapalinový chromatograf s detekcí UV/vis a chromatografická kolona Agilent AdvanceBio Surfactant Profiling (2,1 × 50 mm, tlaková odolnost odpovídající aplikaci). Srovnávací analýzy byly provedeny i na běžných mixed-mode kolónách a konkurenčních reverzně-fázových columnách různých délek (50, 100, 150 mm). Metodika zahrnovala rychlé gradientní eluce a quantifikaci surfaktantů i degradantů.

Hlavní výsledky a diskuse

Studie prokázala, že:

• AdvanceBio kolona umožňuje rozlišení polysorbatu 80 monoesteru od volné oleové kyseliny již během 10 minut (rozlišení >4,9), zatímco tradiční kolony vyžadují až 60 minut.
• Kratší délka kolony (50 mm) poskytuje srovnatelné rozlišení degradantů jako delší kolony (100, 150 mm), což snižuje spotřebu rozpouštědel i dobu analýzy.
• Monitorování tlaku a rozlišení během 2000 injekcí ukazuje vysokou mechanickou stabilitu kolony. Použití ochranných guard kolonek významně prodlužuje životnost analytické kolony.

Přínosy a praktické využití metody

Nová metoda nabízí následující výhody:

• Rychlá detekce a identifikace produktů hydrolytického a oxidačního rozkladu surfaktantů.
• Snížení provozních nákladů díky kratším analýzám a nižší spotřebě rozpouštědel.
• Včasná diagnostika problémů s host-cell proteiny a oxidativními zbytky v raných fázích vývoje bioléčiv.

Budoucí trendy a možnosti využití

V následujících letech se očekává:

• Další rozvoj kolonkových materiálů pro ještě vyšší selektivitu a rychlost separací.
• Integrované LC-MS detekce pro detailní strukturální analýzu rozkladných produktů.
• Automatizované post-metodické softwarové nástroje pro sledování degradace a predikci stability formulací.

Závěr

AdvanceBio Surfactant Profiling kolona představuje efektivní řešení pro komplexní charakterizaci surfaktantů v bioterapeutických formulacích. Zkrácené doby analýzy, vysoké rozlišení a prodloužená životnost kolony vedou ke snížení nákladů a zlepšení kontroly kvality. Včasné odhalení degradace surfaktantů podporuje úspěšný vývoj a schválení biologických léčiv.

Použitá instrumentace

• HPLC systém Agilent s UV/vis detektorem
• Chromatografická kolona Agilent AdvanceBio Surfactant Profiling (2,1 × 50 mm, 100 mm, 150 mm)
• Guard kolony pro ochranu analytických kolonek