Sunniest catalog HPLC Columns

Význam tématu

Vývoj a optimalizace stacionárních fází pro vysokoúčinnou kapalinovou chromatografii (HPLC) zásadně ovlivňuje citlivost, selektivitu a reprodukovatelnost analytických metod. Odstranění reziduálních silanolových skupin, zvýšení hydrofobních vlastností a rozšíření provozního pH umožňují robustní analýzu široké škály látek od malých organických molekul po biomolekuly.

Cíle a přehled studie / článku

Článek představuje rodinu kolon ChromaNik Sunniest (C18, C18-HT, RP-AQUA, C8, PhE, Biphenyl, PFP, PFP&C18, Cyano, Silica) se zaměřením na:

• novou koncepci koncového zablokování („Sunniest end-capping“ a vysokoteplotní silanolové deaktivace),
• porovnání hydrofobnosti, selektivit (vodíkové vazby, hydrofobnost, sterické účinky),
• hodnocení tvaru píků (tailing factor) na modelové sloučenině amitriptylinu,
• stabilitu při extrémním pH a teplotě, reproducibilitu za 100% vodných podmínek,
• aplikace na rozličné analytické výzvy včetně vitamínů, organických kyselin, alkaloidů, lokálních anestetik a chelatačních sloučenin.

Použitá metodika a instrumentace

Pro hodnocení byly použity standardní HPLC metody s mobilními fázemi na bázi methanolu, acetonitrilu a vodných pufrů v různém pH. Experimenty zahrnovaly gradientní i izokratické eluční režimy, detekci UV, Corona CAD a MS (Turboionspray, ABI API-4000).

Použitá instrumentace

• Kolony Sunniest C18, C18-HT, RP-AQUA, C8, PhE, Biphenyl, PFP, PFP&C18, Cyano, Silica (1.8–5 µm, 2.0–4.6 mm i.d.)
• HPLC systémy s UV detektorem, Corona CAD, hmotnostní spektrometrie (Turboionspray)
• Guard cartridge kolony SunShell (PEEK, 10×4 mm, nízký dead-volume)

Hlavní výsledky a diskuse

Nová koncovka Sunniest spolu s vysokoteplotní silanolovou deaktivací významně snižuje počet reziduálních silanolů a zvyšuje hydrofobnost materiálu. Porovnání faktorů selektivity ukázalo:

• nízkou vodíkovou vazebnou selektivitu alkylových fází C18/HT,
• zvýšenou vodíkovou vazebnou aktivitu u PhE, PFP, PFP&C18 a Biphenyl,
• vysokou sterickou selektivitu u PFP & C18 a Biphenyl,
• vynikající tvar píku (TF ≤1,1) pro amitriptylin i při použití acetonitrilu,
• stabilitu >90 % retenční síly i po 100 h v pH 1 (80 °C) a v pH 10 (40–50 °C),
• reprodukovatelnost retenčních časů za 100 % vodných podmínek pro RP-AQUA fázemi (>97 %).

Praktická testování zahrnovala separace vodorozpustných vitamínů, organických kyselin, báze nukleových kyselin, alkaloidů v čaji, lokálních anestetik, chelatačních látek a antidepresiv pro LC-MS, kde Sunniest fázím konkurenční produkty výrazně ustupují v účinnosti, rychlosti a robustnosti.

Přínosy a praktické využití metody

Nové stacionární fáze umožňují:

• šíroké pásmo provozního pH (1,5–10),
• využití 100 % vodných elučních režimů bez „deweting“ efektu,
• vysokou tlakovou odolnost i pro sub-2 µm částice (až 100 MPa),
• vynikající tvar píku pro kyselé, zásadité i chelatační analyty,
• zrychlení analýzy při zachování vysoké účinnosti (2 µm vs. 5 µm).

Budoucí trendy a možnosti využití

Směřování k UHPLC aplikacím, kombinace více módů (2D-LC), další vylepšení povrchových modifikací pro specifické cílové analyty (např. posttranslační modifikace, metabolity), rozšířená kompatibilita s MS a miniaturizace kolonií pro vysokoprůtokové analytické stanice.

Závěr

ChromaNik Sunniest stacionární fáze představují komplexní řešení pro moderní HPLC metody, kombinující nízkou aktivitu povrchu, široké pH použití, vynikající tvar píku, dlouhou životnost a univerzální selektivitu. Provedené studie potvrzují jejich přednosti v řadě analytických scénářů.

Reference

• N. Nagae, T. Enami, S. Doshi, LC/GC North America, October 2002.
• T. Enami, N. Nagae, American Laboratory, October 2004.
• T. Enami, N. Nagae, BUNSEKI KAGAKU, 53 (2004) 1309.