BioLC columns and accessories

Význam tématu

Charakterizace terapeutických proteinů je nezbytná pro vývoj a kontrolu kvality bioléčiv. Přesné rozlišení intactních molekul, subjednotek, agregátů, glykosylací i peptidových fragmentů zajišťuje bezpečnost, účinnost a konzistenci finálních produktů. Moderní chromatografické platformy kombinující různé režimy separace umožňují komplexní profilaci proteinových modifikací a variant.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem katalogu BioLC je představit ucelenou sadu kolových chemtrií a příslušenství pro každou etapu analýzy terapeutických proteinů. Článek přehledně popisuje dostupné affiní, reverzní, iontově-výměnné, hydrofobní, glykosylové, SEC a nukleotidové kolony včetně doporučených aplikací a výkonnostních parametrů.

Použitá metodika a instrumentace

• Chromatografické režimy: affinita (Protein A), HIC, RP, IEX (SCX/SAX), HILIC, SEC, IP-RP
• Typy plniv: polymerické monodisperzní (MDi), pevné jádro, monolitické matrice, 1000–1500 Å póry
• Detekce: UV (214 nm, 260 nm, 280 nm), fluorescenční (320/420 nm), LC-MS
• Platformy: HPLC, UHPLC, mikro-, analýza intactních proteinů i subjednotek

Hlavní výsledky a diskuse

Katalog ukazuje vysoké rozlišení a reprodukovatelnost separací:

• Affinitní kolony MAbPac Protein A pro rychlou kvantifikaci titru mAb
• HIC řada MAbPac HIC-10/20/Butyl pro rozlišení oxidovaných variant, agregátů a ADC
• HILIC Amide-150 a GlycanPac pro detailní analýzu uvolněných N-glykánů
• SEC kolony SurePac Bio 550 MDi a MAbPac SEC-1 pro analýzu agregátů a velikostních variant AAV a mAb
• Reverzní RP MAbPac RP a ProSwift pro intactní/subunit rozbory
• IEX kolony ProPac 3R SCX/SAX, MAbPac SCX-10 a Elite WCX s pH gradienty pro charge variant profiling
• Peptidové kolony Hypersil GOLD Peptide pro reproducibilní peptidové mapování
• Nukleotidové DNAPac RP/PA200 a DNASwift SAX pro separace oligonukleotidů

Přínosy a praktické využití metody

BioLC řada umožňuje:

• Rychlou optimalizaci metod bez složitého ladění mobile fází
• Širokou kompatibilitu s organickými i vodnými fázemi
• Vysokou životnost a nízký carryover pro opakované analýzy
• Jednoduchou automatizaci a validaci v QA/QC laboratořích

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další rozvoj monodisperzních částic, hybridních chemtrií a integrovaných řešení LC-MS pro víceparametrickou analýzu. Vznikají kolony s vylepšenou inertností a kombinované sorbenty pro simultánní selekci variací založených na hydrofobicitě, náboji a glykosylaci. Personalizovaná medicína a pokročilé glyko-a proteomické platformy budou těžit z vyšší citlivosti a rozlišení.

Závěr

BioLC sortiment představuje komplexní nástrojový balíček pro charakterizaci terapeutických proteinů napříč celou škálou alternativních chromatografických režimů. Vysoká robustnost, reprodukovatelnost a rozlišení usnadňují vývoj a kontrolu kvality bioléčiv.