Obelisc LC Columns with Liquid Separation Cell Technology

Význam tématu

Vysokovýkonná kapalinová chromatografie (HPLC) je klíčová pro rozdělení a analýzu malých organických i polárních sloučenin v široké škále aplikací od farmacie až po environmentální monitoring.
Inovativní technologie Liquid Separation Cell (LiSC™) nabízí nové možnosti kombinace iontových a hydrofobních interakcí v jediné kolóně, což zvyšuje účinnost, selektivitu a kapacitu separace.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem textu je představit kolony Obelisc™ R a N od SIELC Technologies, založené na LiSC technologii, a demonstrovat jejich univerzální využití pro separaci jak polárních, tak nepolárních sloučenin.
Text shrnuje princip liSC, popisuje metodický přístup k ladění separace a demonstruje výkon kolón prostřednictvím příkladových separací.

Použitá metodika a instrumentace

Technologie LiSC je založena na modifikaci povrchu křemičitého gelu, která vytváří v pórech „kapalinnou buňku“ s odlišným vnitřním pH, iontovou silou a hydrofobitou oproti vnější mobilní fázi.
Kolony Obelisc R a N kombinují dlouhé organické řetězce s vázanými kladnými i zápornými skupinami, čímž umožňují paralelní elektrostatické i hydrofobní interakce.

Instrumentace:

• Typy kolon: Obelisc R (reverzní fáze s kationtovými skupinami v blízkosti povrchu); Obelisc N (polární fáze s oddělenými aniontovými a kationtovými skupinami).
• Rozměry: délky 10–250 mm, ID 0,5–22 mm, částice 5 a 10 µm, póry 100 Å, integrované ochranné kolony (guard).
• Mobilní fáze: směsi acetonitrilu a vody, pufry ammonium formiát (pH 3), ammonium acetát (pH 5) nebo fosfátové pufry při detekci <220 nm.
• Detekce: UV (220–270 nm), ELSD, kompatibilita s hmotnostní spektrometrií.

Hlavní výsledky a diskuse

Obelisc R prokázala až 10násobně vyšší retenční faktory (k’) pro polární analyty ve srovnání s běžnými C18 kolónami.
Obelisc N efektivně odděluje polární iontové a neutrální sloučeniny v režimech iontové výměny i HILIC.
Selektivita je jednoduše laditelná změnou složení organické fáze, pH a koncentrace pufru:

• Změna % acetonitrilu a pH moduluje konformaci řetězců a vnitřní iontové prostředí kapalinové buňky.
• Při srovnávacích experimentech dochází k obrácení eluce polárních vs. hydrofobních sloučenin mezi kolónami R a N.
• Obelisc R dosahuje lepšího rozlišení isomerů aminopyridinu a metabolitů glyphosatu než referenční kolony RP nebo HILIC.
• Obelisc N umožňuje souběžné oddělení aniontů i kationtů s ELSD detekcí v jednom běhu.

Přínosy a praktické využití metody

Využitím pouhých dvou LiSC kolon lze nahradit řadu specializovaných RP, AQ-RP, NP, IE i HILIC fází, což zjednodušuje a zrychluje vývoj metod.
Obelisc kolony jsou kompatibilní s nízkokoncentrovanými pufry vhodnými pro hmotnostní spektrometrii i pro UV detekci <220 nm.
Díky variabilní selektivitě se metody stávají více experimentální vědou než opt‐in screeningem kolón.

Budoucí trendy a možnosti využití

LiSC technologie otevírá prostor pro:

• Vysokopropustné (high-throughput) aplikace ve farmacii a metabolomice.
• Miniaturizaci kolón pro kapilární a nano-LC systémy.
• Integraci s pokročilou MS/MS platformou pro komplexní profilování vzorků.
• Další ligandové modifikace pro cílené oddělení biomolekul a chirálních sloučenin.

Závěr

Obelisc HPLC kolony s LiSC technologií představují univerzální a vysoce výkonné chromatografické nástroje, které spojují elektrostatické i hydrofobní interakce v jediné fázi.
Výrazně zlepšují retenční kapacitu i selektivitu pro široké spektrum malých a polárních sloučenin a zjednodušují vývoj metod v průmyslových i výzkumných laboratořích.