FlipLCTM. A New Method for Measuring Charged Analytes in Complex Mixtures. Part I.

Význam tématu

Analýza nabitých látek v komplikovaných matricích je klíčová v oblasti potravinového průmyslu, environmentální analytiky i klinických studií. Konvenční HPLC metody často vyžadují složité a časově náročné předúpravy vzorku i speciální detekční techniky, což omezuje jejich univerzálnost a zvyšuje náklady.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie je představit novou metodu FlipLC™ využívající sekvenční uspořádání izolačního a analytického sloupce s vysokotlakým přepínacím ventilem. Metoda umožňuje automatizované čištění vzorku a následnou separaci analytu v jediné běhu.

Použitá metodika

Metoda kombinuje:

• Izolační sloupec s odlišnými retenčními vlastnostmi než analytický sloupec (mixed-mode RP / iontová výměna).
• Vysokotlaký 6-portový, 2-polohový přepínací ventil umístěný mezi autosamplerem a analytickým sloupcem.
• Časované přepnutí ventilu po vstřiku vzorku pro odplavení pozdně eluovaných interferentů z izolačního sloupce na odpad.

Použitá instrumentace

• HPLC systém vybavený UV detektorem (λ = 200 nm).
• Izolační sloupec Primesep 100 (4,6 × 25 mm) – kationtově výměnná RP.
• Analytický sloupec Primesep SB (4,6 × 50 mm) – aniontově výměnná RP.
• 6-portový, 2-polohový vysokotlaký přepínací ventil ovládaný chromatografickým softwarem.
• Mobilní fáze: gradient acetonitril 20–70 % v 8 min, následně 3 min udržovací stupeň; 0,4 % H₂SO₄.
• Objem vstřiku: 20 µl.

Hlavní výsledky a diskuse

Jednosloupcová měření (Primesep SB nebo Primesep 100) neumožňují detekci dusičnanů v komplexních vzorcích (např. kuřecí vývar) kvůli silné interferenci koeluujících látek. V konfiguraci s ventilem a dvěma sloupci byl vrchol dusičnanů plně oddělen od příměsí.
Metoda byla aplikována na stanovení dusičnanů v různých vzorcích:

• Čerstvá hlávková salát: 761,34 ppm
• Meloun: 56,78 ppm
• Lidský moč: 30–80 ppm
• Minerální voda San Pellegrino®: 3,00 ppm
• Kuřecí vývar: 2,86 ppm

Přínosy a praktické využití metody

• Odstranění časově náročných předúprav vzorku.
• Prodlužení životnosti analytického sloupce díky minimalizaci kontaminace.
• Univerzální aplikace napříč různými typy vzorků (potraviny, voda, biologie, půda).
• Možnost rozšíření na další UV-aktivní anorganické anionty (bromid, jodid) a polární organické sloučeniny.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Adaptace pro destruktivní detekční techniky (MS) s úpravou konfigurace ventilu.
• Integrace do plně automatizovaných online monitorovacích systémů.
• Miniaturizace sloupců (UHPLC) pro další zkrácení analýzy.
• Rozšíření spektra analyzovaných látek o širokou škálu iontů a polárních molekul.

Závěr

FlipLC™ představuje efektivní a univerzální přístup k analýze nabitých látek v komplikovaných matricích. Díky kombinaci izolačního a analytického sloupce s vysokotlakým ventilem je možné automatizovat čištění vzorku, zkrátit dobu analýzy a prodloužit životnost kolon. Metodu lze aplikovat na různé typy vzorků a rozšířit o další detekční techniky i analyty.

Reference

• SIELC Technologies, Inc. FlipLC™: A New Method for Measuring Charged Analytes in Complex Mixtures. 2002–2018.