The Development of a Virtual Liquid Chromatography Method Development Tool

Význam tématu

Laboratorní vývoj LC metod je časově i finančně náročný a vyžaduje dedicovaný instrumentální čas. Virtuální modelovací nástroj snižuje potřebu skutečných analýz, šetří prostředky laboratorní instrumentace a urychluje optimalizaci separací, zejména u metod pro analýzu drog.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo vyvinout bezplatný softwarový nástroj pro virtuální vývoj LC metod na základě rozsáhlé knihovny látek z kategorie drog, který dokáže spolehlivě předpovídat retenční časy a zachovat kritické rozlišení párů látek. Nástroj podporuje různé fázové chemie, dimenze kolony, mobilní fáze, gradienty a teploty.

Použitá metodika a instrumentace

Metodika zahrnuje sběr retenčních časů přibližně 180 sloučenin s využitím tří různých gradientů, tří teplot a tří šarží kolony. Každá skupina analýz zahrnovala cca 30 látek a devět tzv. meld compounds pro ověření souladu s databází.

• Columns: Raptor Biphenyl 2.7 µm (50×2.1 mm, 100×2.1 mm), Raptor C18 2.7 µm
• Teplota kolony: 30, 35, 40, 45, 50 °C
• Mobilní fáze: A – voda + 0.1 % kyseliny mravenčí, B – acetonitril nebo methanol + 0.1 % kyseliny mravenčí
• Gradienty: lineární, isokratický hold, víceúrovňový
• Detekce: MS/MS v režimu ESI+, MRM
• Injekční objem: 1 µL, koncentrace standardu: 100 ng/mL

Hlavní výsledky a diskuse

Validace zahrnovala 704 datových bodů napříč 14 proměnnými. 98,15 % retenčních časů bylo předpovězeno s přesností do ±15 sekund. Rozdíly mezi empirickými a modelovanými hodnotami byly systematicky nízké, přičemž pouze 13 sloučenin překročilo toleranci. Přenositelnost modelu mezi různými kolonymi, fázemi a instrumenty byla potvrzena.

Přínosy a praktické využití metody

• Minimalizace doby a nákladů spojených s vývojem LC metod bez ohrožení kvality separace
• Zvýšení instrumentální propustnosti a snížení potřeby opakovaných testů
• Užitečné pro výzkumné i rutinní QA/QC laboratoře, zejména pro analýzu drog a psychoaktivních látek

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření dimenzí kolony (30×2.1, 150×2.1 mm) a nové SPP a FPP částice
• Doplnění knihoven o kanabinoidy, NPS a další psychoaktivní látky
• Podpora UV detekce a vícejazyčného uživatelského rozhraní
• Integrace s dalšími analytickými platformami a automatizovanými laboratorními systémy

Závěr

Virtuální LC modelér účinně předpovídá retenční časy s vysokou přesností a podporuje rychlou optimalizaci metod bez nutnosti rozsáhlých laboratorních experimentů. Nabízí robustní nástroj pro vývoj a validaci LC metod v oblasti drogových analýz.

Reference

Žádné specifické literatury neuvedeno