Performance Evaluation of Flownamics Sampling Devices for the Agilent Online LC

Význam tématu

Moderní biotechnologická výroba, např. monoklonální protilátky, vyžaduje přesné a kontinuální monitorování reakcí v bioreaktorech. Aseptické automatizované vzorkování a online chromatografická analýza umožňují optimalizovat kultivační podmínky a zkrátit dobu zásahu obsluhy.

Cíle a přehled studie

Tato studie popisuje integraci přístroje Agilent 1260 Infinity II Online LC se samplingovými moduly Flownamics SegFlow S3 a SampleMod pro automatizované odběry z bioreaktorů. Studium se zaměřuje na návrh hardwarového a softwarového propojení a hodnocení klíčových výkonových parametrů vzorkování a diluce.

Použitá metodika a instrumentace

• Agilent 1260 Infinity II Online LC se 1290 Infinity II pumpou, multicolumn termostatem, Online Sample Managerem s externím ventilem a diode array detektorem
• Kolona ZORBAX RRHD Eclipse Plus C18 (3,0×50 mm, 1,8 µm)
• Flownamics SegFlow S3 pro automatizované odběry z osmi bioreaktorů
• Flownamics SampleMod S3 pro předředění a distribuci vzorků
• Software Agilent OpenLab CDS a Online LC Monitoring Software
• Control software FlowWeb (Flownamics)

Hlavní výsledky a diskuse

• Opakovatelnost ploch chromatografických píků (RSD) dosahovala 0,4–1,0 % při různých režimech diluce a injekce
• Lineární rozsah dilutionních faktorů 1 až 20 vykázal koeficient R2 = 0,9992
• Přesnost diluce se standardními kroky motoru dosahovala 81–91 %, s možností optimalizace až k požadované hodnotě
• Mezi-reaktorový carryover byl stanoven na 0,44 %, což je srovnatelné s požadavky pro kontinuální online analýzu

Přínosy a praktické využití metody

Automatizovaný systém umožňuje bezobslužné vzorkování, předředění a chromatografickou analýzu v reálném čase. To zvyšuje reprodukovatelnost, minimalizuje riziko kontaminace a snižuje čas potřebný pro manuální zásahy.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření počtu paralelních bioreaktorů a analytických parametrů
• Integrace strojového učení pro prediktivní optimalizaci kultivačních podmínek
• Implementace do širších digitálně řízených bioprodukčních linek
• Další vylepšení softwarové komunikace a uživatelského rozhraní

Závěr

Spojení Agilent Online LC se samplingovými moduly Flownamics prokazuje vysokou přesnost, linearitu a nízký carryover. Systém nabízí robustní řešení pro kontinuální on-line monitorování bioprodukčních procesů.

Reference

1. Herschbach H, Kutscher D, Naegle E, Ortmann T, Wouters S. Reactor Sample Dilution and Mixing Performance of the Agilent 1260 Infinity II Online Sample Manager. Agilent Technologies Technical Overview, Pub. 5994-3679EN, 2021.
2. Herschbach H, Kutscher D, Naegle E, Ortmann T, Spuling I, Wouters S. Performance Characteristics of the Agilent 1260 Infinity II Online Sample Manager. Agilent Technologies Technical Overview, Pub. 5994-3529EN, 2021.