Automatic Sprayer for MALDI Imaging iMLayer AERO

Význam tématu

MALDI imaging je klíčová technika pro prostorové mapování molekul v biologických vzorcích. Přesné nanášení matrixu zásadně ovlivňuje citlivost a prostorové rozlišení výsledných snímků. Automatizované přístupy zvyšují reprodukovatelnost a usnadňují rutinní analýzy.

Cíle a přehled studie

Cílem je představit iMLayer AERO systém pro automatizované nanášení matrixu v MALDI imagingu. Systém integruje regulovaně pohybující se stolku a speciální rozprašovací hubici pro stabilní depozici jemných krystalů matrixu. Workflow zahrnuje předúpravu vzorku derivatizací nebo enzymovou digestí, nanášení matrixu, MALDI MSI analýzu a následnou datovou analýzu.

Použitá metodika a instrumentace

Systém iMLayer AERO kombinuje:

• pohybující se vzorkovou stolku s pevnou vzdáleností 5 az 10 cm od rozprašovací hubice
• vlhkostní kontrolu a výměnu atmosféry dusíkem pro stabilní podmínky
• rinsovací mechanismus pro prevenci ucpání hubice
• speciální ovládací software s experimentálním průvodcem a přednastavenými metodami
• dvojkrokovou vaporizaci matrixu následovanou sprejováním pro dosažení rozlišení 5 az 10 μm

Specifikace instrumentace:

• Kompatibilní matrixy DHB, 9-AA, CHCA
• Derivatizační činidlo Girard T
• Trávící enzym Trypsin
• Vzorky na mikroskopických sklíčkách (76 × 26 mm)
• Rozměry W 400 × D 480 × H 445 mm, hmotnost 33 kg
• Napájení 100 az 240 VAC, 50/60 Hz, max 100 VA
• Podmínky skladování 18 az 28 °C, 40 až 70 % vlhkost
• Dusík čistoty ≥ 90 %, průtok 20 L·atm/min

Hlavní výsledky a diskuse

Automatizované nanášení matrixu dosahuje citlivosti srovnatelné s ručním sprejováním při významně lepší homogenitě a reprodukovatelnosti. Dvoufázová vaporizace a sprejování minimalizuje rozostření obrazu a umožňuje prostorové rozlišení až 5 μm. Kontrola vlhkosti a rinsovací mechanismus zajišťují stabilitu signálu napříč vzorkem.

Přínosy a praktické využití metody

• Zvýšená reprodukovatelnost a konzistence výsledků
• Možnost analýzy širokého spektra látek díky kompatibilitě s derivatizacemi a enzymatickými úpravami
• Vhodné pro výzkum distribuce malých metabolitů, lipidů a peptidů v biologických vzorcích
• Usnadnění rutinních QA/QC procesů v průmyslové analytice

Budoucí trendy a možnosti využití

Automatizace předpřípravy vzorků bude dále směřovat k integraci více etap přípravy včetně multiplexních derivatizací a enzymatických úprav. Kombinace s novými detektory a vyšším prostorovým rozlišením umožní rozvoj multimodálních zobrazovacích metod a aplikace v klinických a farmaceutických výzkumech.

Závěr

iMLayer AERO představuje robustní řešení pro automatizovanou deposici matrixu v MALDI imagingu, které spojuje vysokou citlivost, vynikající prostorové rozlišení a reprodukovatelnost. Díky variabilnímu nastavení a možnosti předúprav rozšiřuje možnosti prostorové analýzy molekul v biologických vzorcích.

Reference

1. Patenty JP6153139 a JP6183779