Assay for Water-Soluble Vitamins in Vitamin Tablets Using a Thermo Scientific ™ Acclaim™ PolarAdvantage (PA) Column

Význam tématu

Analýza vodou rozpustných vitaminů v tabletách je nezbytná pro ověření kvality a bezpečnosti doplňků stravy. Díky vysoké polarity těchto sloučenin je třeba zajistit dostatečnou retenci a rozlišení v komplexní matrici tablet. Použití speciálních HPLC kolon umožňuje spolehlivou separaci i při 100 % akvatické mobilní fázi, čímž se předejde problémům s dewettingem běžných C18 stacionárních fází.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo vyvinout rychlou, citlivou a reprodukovatelnou metodu pro simultánní stanovení osmi hlavních vodou rozpustných vitaminů v komerčně dostupné tabletě One-A-Day Active Formula. Studie ověřila schopnost analytického systému odlišit a kvantifikovat vitaminy B1, B2, B3, B5, B6, B9, B12 a C v jednom chromatografickém běhu.

Použitá metodika a instrumentace

Pro separaci byla použita následující instrumentace a parametry:

• Kolona Thermo Scientific Acclaim PolarAdvantage PA, 4,6 × 150 mm, částice 3 µm
• Mobilní fáze: pufr fosfátový pH 3,4 s gradientem 0–20 % acetonitrilu během 20 minut
• Detekce: diodový array detektor (UVD 340) s primárními a alternativními vlnovými délkami pro potvrzení identity
• Příprava vzorku:
  1. Rozmělnění 1500 mg tablety
  2. Extrahování 150 mg vzorku v 100 mL pufru pH 3,4
  3. Sonikace 10 min
  4. Filtrace a injekce 20 µL roztoku do přístroje

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda umožnila rozlišení všech osmi vitaminů v časech retence od 2 do 17 minut. PolarAdvantage kolona zachovala vysokou účinnost i při 100 % vodné mobilní fázi, bez známek dewettingu. Vícevlnová detekce zajistila přesnou kvantifikaci i potvrzení identity pomocí charakteristických absorpčních maxim pro každý vitamin.

Přínosy a praktické využití metody

Navržená HPLC metoda nabízí:

• Rychlou analýzu kompletního spektra vodou rozpustných vitaminů
• Vysokou reprodukovatelnost retence a ploch píků díky robustnímu sloupci
• Možnost aplikace v kontrolních laboratořích QA/QC i výzkumných pracovištích

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj metodiky může vést k:

• Přechodu na UHPLC se sub-2 µm částicemi pro zkrácení analýzy
• Integraci hmotnostní detekce (LC-MS) pro zlepšení citlivosti a selektivity
• Využití zelenějších mobilních fází s nižším obsahem organických rozpouštědel
• Automatizaci přípravy vzorků a online filtraci pro vyšší propustnost laboratoře

Závěr

Optimalizovaná HPLC metoda s kolonkou PolarAdvantage PA poskytuje spolehlivou a efektivní analýzu vodou rozpustných vitaminů v tabletkách. Díky vysoké účinnosti separace a vícevlnové detekci je vhodná pro rutinní kontrolu kvality doplňků stravy.

Reference

• Thermo Fisher Scientific Inc. (2009). Assay for Water-Soluble Vitamins in Vitamin Tablets Using a Thermo Scientific Acclaim PolarAdvantage (PA) Column. Application Note 19350.
• Bayer Corp. One-A-Day je registrovaná ochranná známka.