Shim-pack HPLC Columns for Bioseparation

Význam tématu

Bioanalytická separace bílkovin, peptidů a nukleových kyselin je klíčová pro biotechnologický výzkum a kontrolu kvality farmaceutických přípravků. Vysoce efektivní HPLC kolonky umožňují přesnou charakterizaci molekulárních vlastností biologických vzorků, detekci variant a kvantifikaci analytů v komplexních matricích.

Cíle a přehled studie / článku

Představená publikace popisuje portfolio Shim-pack HPLC kolonek určených pro bioseparace. Cílem je ukázat vhodné chromatografické režimy (iontová výměna, hydrofobní interakce, velikostní výlučování, reverzní fáze) pro různé typy analyzovaných biomolekul a demonstrovat aplikace na monoklonální protilátky, konjugáty, peptidy a oligonukleotidy.

Použitá metodika a instrumentace

V textu jsou uvedeny příklady:

• Ion exchange (Shim-pack Bio IEX Q/SP, SP-NP) pro analýzu izoelektrických variant protilátek.
• Size exclusion (Shim-pack Bio Diol 60–300 Å) pro detekci agregátů a fragmentů.
• Hydrophobic interaction (Shim-pack Bio HIC Butyl) pro stanovení DAR u ADC.
• Reversed phase (Shim-pack GISS C18, Shim-pack Scepter C4) pro peptidové mapování a nukleové kyseliny.
• LC-MS/MS (Shim-pack Scepter C18-120 metal-free) pro kvantitativní analýzu oligonukleotidů.
• Pomůcky: nízkoadsorpční mikrodestičky TORAST-H, vials TORAST-H Bio.

Hlavní výsledky a diskuse

Aplikace ukázaly:

• Vysoce rozlišené chromatogramy pro isoformy protilátek (spodní a vrchní varianty).
• Rychlou a citlivou separaci agregátů monoklonálních IgG a ADC fragmentů s vynikajícím rozlišením.
• Reprodukovatelnou kvantifikaci DAR u ADC s nízkým RSD.
• Účinné oddělení oligonukleotidů různých délek a modifikací pomocí iontově-párované RP a iontově-exchange HPLC.

Přínosy a praktické využití metody

Shim-pack kolony poskytují:

• Flexibilní výběr strategie separace podle vlastností analyzátu.
• Vysokou účinnost, opakovatelnost a robustnost metod.
• Snížení matrikových interferencí a zlepšení citlivosti detekce.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekávané směry vývoje:

• Integrace HPLC s vysoce citlivou MS detekcí pro komplexní proteomiku a glykomiku.
• Nové povrchy kolonek pro separaci biokonjugátů a nanočástic.
• Automatizované platformy multifázových separací pro screening biologických vzorků.

Závěr

Portfolio Shim-pack HPLC kolonek nabízí komplexní řešení pro bioanalytické aplikace. Vysoká účinnost, široké pH a teplotní rozmezí a dostupnost speciálních povrchů umožňují přesné a spolehlivé rozlišení biologických molekul různých vlastností. Díky doporučené instrumentaci a spotřebnímu materiálu lze metody snadno implementovat v moderních laboratořích.

Reference

1. Shimadzu Application Note C190-E294, Shim-pack HPLC Columns for Bioseparation, 2023.
2. Produktové listy Shimadzu Corporation, 2023.