Rapid Screening Method for Statins Using an Advanced UHPLC Column and System

Význam tématu

Analýza statinů hraje klíčovou roli v kvalitativní a kvantitativní kontrole farmaceutických přípravků a monitorování léčiv v biologických vzorcích. Rychlý a spolehlivý screening umožňuje zkrácení doby analýzy, zvýšení propustnosti laboratoře a zajištění přesné separace látek s velmi podobnými fyzikálně-chemickými vlastnostmi.

Cíle a přehled studie / článku

Studie předkládá aplikaci rychlé chromatografické metody pro separaci devíti statinů na kolóně Hypersil GOLD VANQUISH 1,9 µm ve spojení se systémy Vanquish UHPLC. Cílem bylo demonstrovat výhody využití nelineárního gradientu, vysokého provozního tlaku až 1500 barů a zvýšených průtoků pro zkrácení doby analýzy při zachování požadované rozlišovací schopnosti.

Použitá metodika a instrumentace

• Kolóna: Hypersil GOLD VANQUISH, 1,9 µm, 100 × 2,1 mm
• UHPLC systém: Thermo Scientific Vanquish (max. 1500 bar), Binary Pump H, Split Sampler HT, Column Compartment H, Diode Array Detector HL, LightPipe flow cell 10 mm
• Mobilní fáze A: 0,1 % kyselina mravenčí ve vodě; B: 0,1 % kyselina mravenčí v acetonitrilu
• Průtoky testovány 0,5–1,4 mL/min; teplota kolóny 40 °C; objem injekce 1 µL; detekce UV při 240 nm
• Software: Chromeleon 7.2 SR2 s integrovaným kalkulátorem pro rychlé přeškálování metod

Hlavní výsledky a diskuse

Lineární gradient při 0,5 mL/min zajistil separaci většiny sloučenin, avšak kritické páry (fluvastatin/atorvastatin) vykazovaly nedostatečné rozlišení. Použitím nelineárního gradientu (křivka 8) se dosáhlo dobré separace všech devíti statinů za 8 minut. Další zvýšení průtoku na 1,0–1,4 mL/min při konstantním sklonu gradientu umožnilo zkrátit dobu analýzy pod 3 minuty, aniž by byla výrazně narušena rozlišovací kapacita (USP rozlišení >1,5 u kritických párů). Replikovatelnost retenčních časů (RSD <0,2 %) a konstantní rozlišení potvrdily vysokou stabilitu systému.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlý screening statinů s vysokou propustností laboratorních analýz
• Zkrácení doby analýzy pod 3 minuty při zachování požadované separace
• Vysoká reprodukovatelnost retenčních časů díky nízké pulzaci pumpy a inteligentnímu pre-kompresnímu systému
• Jednoduché škálování metody pro odlišné laboratorní potřeby pomocí integrovaného kalkulátoru

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření metody na rutinní monitoring statinů v klinických a environmentálních vzorcích
• Integrace s hmotnostní spektrometrií pro zvýšení selektivity a citlivosti
• Automatizace přípravy vzorků a validace metod podporovaná pokročilými datovými platformami
• Využití pokročilých algoritmů pro optimalizaci gradientních profilů a rychlou adaptaci na nové sloučeniny

Závěr

Popsaná aplikace prokázala, že kombinace kolóny Hypersil GOLD VANQUISH 1,9 µm a UHPLC systému Vanquish nabízí efektivní a flexibilní řešení pro rychlý screening statinů. Využití nelineárního gradientu a vysokého tlaku umožnilo zkrátit dobu analýzy a současně zajistit vysokou opakovatelnost a dostatečné rozlišení analytů.

Reference

• Hillbeck D. Rapid Screening Method for Statins Using an Advanced UHPLC Column and System. Application Note AN21496-EN, Thermo Fisher Scientific, 2016.