Determination of Phytic Acid in Soybeans and Black Sesame Seeds

Význam tématu

Phytát (inositol hexafosfát) je hlavní formou skladování fosfátů v semenech a zrnech, přičemž u lidí není stravitelný a může negativně ovlivnit vstřebávání minerálů (železa, vápníku). Současně je považován za silný antioxidant s antikarcinogenním potenciálem. Kvantifikace fytátu v potravinách je proto klíčová pro posouzení jejich nutriční a technologické kvality.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo zavést rychlou, přesnou a snadno použitelnou metodu na bázi Reagent-Free Ion Chromatography (RFIC) pro stanovení fytátu v sójových semenech a černém sezamu. Metoda využívá isokratickou eluci hydroxidu draselného, automatické generování eluentu a supresovanou vodivostní detekci, přičemž minimalizuje potřebu manuální přípravy činidel.

Použitá instrumentace

• RFIC systém Thermo Scientific Dionex ICS-2000 (nebo ekvivalentní) s Chromeleon CDS softwarem.
• Kolony Dionex IonPac AS11-HC (4×250 mm) a AG11-HC (4×50 mm) jako ochranná.
• Eluentní generátor Dionex EluGen EGC II KOH s CR-ATC aniontovým odlučovačem.
• Supresor Dionex ASRS 300, 4 mm, recycle režim, 200 mA.
• Dionex OnGuard II Ag/H kartridž pro odstranění chloridů.

Metodika

Vyškolené standardy fytátu (0,1–10 mg/L) se připravily ředěním zásobního roztoku. Vzorky semínek se mlely, extrahovaly v 3 M HCl při varu a po ochlazení se vzorek upravil na objem 50 mL a filtroval. Následovala pasáž přes OnGuard II Ag/H kartridž. Eluent 65 mM KOH byl kontinuálně generován, průtok 1,0 mL/min, teplota 35 °C, vpravováno 10 µL vzorku.

Hlavní výsledky a diskuse

• Fytát se odděluje během 7 min a anorganické anionty elutují dříve bez interferencí.
• Metodní detekční limit (MDL) odhadnutý na 0,03 mg/L (10 µL injekce) odpovídá 3×10⁻⁴ µg fytátu, lepší nebo srovnatelný s dřívějšími postupy.
• Lineární kalibrace v rozsahu 0,1–10 mg/L s koeficientem determinace ≥0,999.
• Reprodukovatelnost (RSD) přípravy a analýzy pod 2 % pro oba typy vzorků.
• Obsah fytátu: sójové semeno 1,59 g/100 g, černý sezam 1,90 g/100 g.
• Recovery testy prokázaly 96,8–115 % návratnost fytátu.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlá analýza (<10 min na vzorek) bez manuální přípravy eluentu či regenerantu.
• Vysoká selektivita a citlivost vhodná pro potravinářské laboratoře a kontrolu kvality.
• Minimální nutnost chemikálií a nižší riziko korozních nebo provozních problémů.

Budoucí trendy a možnosti využití

Metodu lze rozšířit na další potravinářské a rostlinné matrixy po ověření přípravy vzorku. Potenciál má spojení s hmotnostní spektrometrií, vysokoprůtokové systémy pro vyšší propustnost a plná automatizace přípravy vzorků včetně SPE.

Závěr

Popsaná RFIC metoda pro stanovení fytátu v sójových a sezamových semenech je rychlá, přesná, reprodukovatelná a snadno použitelná. Díky eliminaci manuální přípravy eluentu představuje robustní nástroj pro rutinní potravinářskou analýzu.

Reference

• 1. Talamond P.; Gallon G.; Guyot J. P.; Lape I. M.; Trèche S. Analusis 1998, 26, 396–399.
• 2. Talamond P.; Gallon G.; Trèche S. J. Chromatogr. A 1998, 805, 143–147.
• 3. Talamond P.; Doulbeau S.; Rochette I.; Guyot J. P.; Trèche S. J. Chromatogr. A 2000, 871, 7–12.
• 4. Phillippy B. Q.; Bland J. M.; Evens T. J. J. Agric. Food Chem. 2003, 51, 350–353.
• 5. Chen Q. C.; Li B. W. J. Chromatogr. A 2003, 1018, 41–52.
• 6. Pontoppidan K.; Pettersson D.; Sandberg A.-S. Anim. Feed Sci. Technol. 2007, 132, 137–147.