Analysis of Ginsenosides in Ginseng

Význam tématu

Ginsenosidy patří mezi klíčové bioaktivní složky ženšenu s širokým spektrem farmakologických účinků. Spolehlivá kvantifikace těchto triterpenových saponinů je zásadní pro kontrolu kvality, standardizaci extraktů a klinický výzkum přípravků na bázi ženšenu.

Cíle a přehled studie / článku

Účelem prezentované studie je demonstrovat analytickou metodu pro separaci a stanovení tří hlavních ginsenosidů (Rg1, Re, Rb1) pomocí reverzní fázové kapalinové chromatografie (RP-LC) na sloupci Shim-pack GISS C18. Studie obsahuje popis vzorkovacího postupu, chromatografických podmínek a ukázkové chromatogramy standardního mixu i extraktu z ženšenu.

Použitá metodika a instrumentace

Postup předúpravy vzorku:

• Odměření 1 g sušeného prášku ženšenu
• Reflux v chloroformu po dobu 3 hodin, odstranění chloroformové frakce
• Vysušení zbytků spolu s filtračním papírem
• Přenos do 100 ml Erlenmeyerovy baňky, přidání 50 ml n-butanolu, extrakce přes noc
• Ultrazvuková podpora (250 W, 33 kHz) po dobu 30 minut
• Filtrace, odebrání 25 ml filtru, vysušení v odpařovací misce
• Rozpuštění zbytku v methanolu, doplnění do 5 ml, promíchání a filtrace do vialky

Chromatografické podmínky:

• Kolona: Shim-pack GISS C18 (250 × 4,6 mm, 5 µm)
• Mobilní fáze: A – voda; B – acetonitril
• Gradient: 19 % B (0–35 min) → 29 % B (55–70 min) → 40 % B (100 min)
• Průtok: 1,0 ml/min
• Teplota kolony: 35 °C
• Objem injekce: 10 µl
• Detekce: UV při 203 nm

Hlavní výsledky a diskuse

Chromatogram standardního mixu ukázal dobře oddělené píky ginsenosidů Rg1, Re a Rb1 s dostatečným rozlišením v průběhu 100minutového běhu. Podobná selektivita byla dosažena i u extraktu z ženšenu, což potvrzuje univerzálnost metody pro komplexní vzorky.
Optimalizovaný gradient poskytuje kompromise mezi dobou analýzy a rozlišením, přičemž zajišťuje reprodukovatelnost retenčních časů a snižuje interferenci matice.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí:

• Vysokou selektivitu a citlivost pro klíčové ginsenosidy
• Reprodukovatelnost a robustnost vhodnou pro rutinní QA/QC v potravinářském i farmaceutickém průmyslu
• Možnost adaptace na LC-MS pro další identifikaci doprovodných saponinů

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj může směřovat k:

• Zrychlení analýzy pomocí ultra-výkonné kapalinové chromatografie (UHPLC)
• Integraci s hmotnostní spektrometrií pro detailní strukturuální charakterizaci
• Automatizaci předúpravy vzorků a online-extrakci

Závěr

Popsaná RP-LC metoda na sloupci Shim-pack GISS C18 umožňuje spolehlivou separaci a stanovení ginsenosidů Rg1, Re a Rb1. Díky dobře definované předúpravě a optimalizovanému gradientu nabízí metoda vysokou reprodukovatelnost a praktičnost pro rutinní analýzu vzorků ženšenu.

Reference

Shimadzu Corporation. Analysis of Ginsenosides in Ginseng, First Edition: Mar. 2023, ERAS-1000-0064