Analysis of Notopterol and Isoimperatorin in Notopterygium

Význam tématu

Notopterygium je tradiční čínská bylinná droga známá obsahem bioaktivních kumarinů notopterolu a isoimperatorinu. Kvalitativní i kvantitativní stanovení těchto látek je klíčové pro zajištění účinnosti, bezpečnosti a jednotné kvality přípravků vyrobených z této suroviny.

Cíle a přehled studie

Cílem popsané studie bylo vyvinout a ověřit jednoduchou reverzně-fázovou chromatografickou metodu pro rychlé a reprodukovatelné stanovení notopterolu a isoimperatorinu v práškových vzorcích Notopterygium. Studie demonstruje přípravu standardního a vzorkového roztoku, chromatografickou separaci dvou analyzovaných kumarinů a jejich detekci fotometricky při 310 nm.

Použitá metodika

Pro extrakci byly užity následující kroky:

1. Odsítění komerčního prášku Notopterygium přes síto č. 3.
2. Přesné zvážení 0,40 g vzorku a vložení do kuželové baňky se zátkou.
3. Naplnění baňky 50 mL methanolu a opětovné zvážení pro určení přidaného objemu.
4. 30minutová ultrazvuková extrakce (250 W, 50 kHz).
5. Po ochlazení doplnění methanolem do původní hmotnosti a promíchání.
6. Filtrace konečného extraktu do vialky pro chromatografii.

Použitá instrumentace

• Chromatograf: Shimadzu LC s reverzně-fázovou kolonkou Shim-pack Scepter C18-120 (250 mm × 4,6 mm I.D., 5 µm).
• Mobilní fáze: voda (A) a acetonitril (B) v poměru A : B = 56 : 44 za izokratického režimu.
• Proudění mobilní fáze: 1,0 mL/min.
• Teplota kolony: 40 °C.
• Objem injekce: 5 µL pro standard, 10 µL pro vzorek.
• Detektor: UV při vlnové délce 310 nm.
• Vialky: LabTotal™ pro LC/LCMS.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda umožnila rozdělení notopterolu a isoimperatorinu s dostatečným rozlišením během izokratické separace. Chromatogram standardní směsi ukázal dvě ostré a dobře oddělené píky. Použitá extrakční procedura poskytla opakovatelné výsledky bez zřetelného šumu či interferencí z matrice byliny. Celkový čas analýzy je krátký, což zvyšuje průchodnost laboratoře.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda kombinuje jednoduchou přípravu vzorku s běžně dostupnou chromatografickou kolonkou a izokratickým režimem, čímž se minimalizuje čas na analýzu i spotřeba rozpouštědel. Je ideální pro rutinní kontrolu kvality surovin a finálních produktů na bázi Notopterygium v nutričních doplňcích či farmaceutikách.

Budoucí trendy a možnosti využití

Možnosti rozšíření zahrnují:

• Integraci hmotnostní spektrometrie pro zvýšení selektivity a citlivosti.
• Přechod na ekologičtější mobilní fáze nebo tlakové extrakční techniky.
• In-line stanovení dalších příbuzných kumarinů v komplexních bylinných směsích.
• Automatizovanou přípravu vzorků pro vysokokapacitní analýzy.

Závěr

Vyvinutá RP-LC metoda pro stanovení notopterolu a isoimperatorinu v Notopterygium je rychlá, robustní a snadno implementovatelná v běžně vybavených analytických laboratořích. Poskytuje spolehlivou základnu pro kontrolu kvality tradičních bylinných produktů.

Reference

• Shimadzu Corporation. Analysis of Notopterol and Isoimperatorin in Notopterygium. Application Note ERAS-1000-0015, March 2023.