Low-flow UHPLC-MS columns connection guide

Význam tématu

Veškeré postupy propojení low-flow UHPLC kolonek s ESI zdroji jsou klíčové pro zachování citlivosti, reprodukovatelnosti a minimalizaci mrtvého objemu při analýze biologických vzorků. Přesná a rychlá instalace nanoViper fittingů usnadňuje každodenní práci v proteomice a metabolomice.

Cíle a přehled článku

Příručka popisuje krok za krokem propojení Thermo Scientific nanoViper a Double nanoViper (DNV) kolonek s EASY-Spray a Nanospray Flex iontovými zdroji na platformě Vanquish Neo UHPLC. Obsahuje nastavení vzdáleností emitru, montáž viper spojek i postupy pro připojení bez teplotní kontroly i s ní.

Použitá metodika a instrumentace

• Tool-free nanoViper fittingy: černá rukojeť, utažení 1/8 otáčky po dotažení prsty
• Emitter positioning tool pro nastavení 0 mm mezery mezi iontovým transferem a emitorem
• Vanquish Neo UHPLC System s autosamplerem
• Thermo Scientific EASY-Spray HPLC kolony a zdroj s integrovaným řízením teploty
• Thermo Scientific Nanospray Flex ion source
• MicroTight adapter (1/16"–1/32") a kovový emitter pro Nanospray Flex
• Torqovací nástroj pro přesné utažení viper spojek
• 2× nanoViper kapiláry 20 µm × 550 mm, DNV kolony, emitery 10–30 µm I.D.

Hlavní výsledky a diskuse

Propojení pomocí nanoViper fittingů a správného nastavení mezery mezi emitterem a iontovým transferem (3 mm pro EASY-Spray, 0 mm při kalibraci) zajistilo opakovatelné a bezodpadní spojení. Systém s teplotní kontrolou umožnil stabilní výkon a reprodukci v rámci několika kolonek, přičemž torzní nástroj garantoval optimální přitažení.

Přínosy a praktické využití metody

• Minimalizace mrtvého objemu pro zvýšení citlivosti
• Rychlá a intuitivní montáž bez úniku spojů
• Kompatibilita se systémy Vanquish Neo UHPLC a různými ESI zdroji
• Možnost volby připojení s teplotní kontrolou či bez ní
• Jednoduchá údržba a výměna kolonek během vysokopropustných analýz

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další vývoj automatizovaných spojovacích modulů, integrace do mikrofluidních platforem a vylepšení emitterů z nových materiálů. Zlepšení softwarové podpory by mohlo umožnit automatické vyhodnocení kvality spojů a přediktivní údržbu.

Závěr

Propojení nízkoprůtokových UHPLC kolonek s iontovými zdroji pomocí systému nanoViper a DNV s sebou přináší vyšší reprodukovatelnost, snížení mrtvého objemu a zjednodušení laboratorních postupů. S využitím správné instrumentace a softwarové podpory lze dosáhnout nadstandardní kvality analýz.