Determination of Ochratoxin A in Coffee via FREESTYLE ThermELUTE™ with Online HPLC-Measurement

Význam tématu

Mykotoxin ochratoxin A je vysoce toxická látka produkovaná plísněmi při skladování potravinových matric jako káva, koření či obiloviny. Její sledování je klíčové pro ochranu zdraví spotřebitelů a splnění legislativních limitů stanovených evropskými nařízeními.

Cíle a přehled studie

Cílem článku je prezentovat rychlou a plně automatizovanou metodu stanovení ochratoxinu A v kávě. Metoda kombinuje extrakci, čistící krok pomocí imunoadsorpční kolony OtaCLEAN SMART a online spojení se systémem HPLC s fluorescenční detekcí. Celkový čas analýzy je přibližně 30 minut.

Použitá metodika

Opis extrakce vzorku:

• Vzorky byly extrahovány a připraveny dle manuálu OtaCLEAN SMART
• Po centrifugaci a profiltrování byla odebrána alikvota do 16ml vialu

Automatizace procesu:

• Vzorek naložen do FREESTYLE ThermELUTE
• Čištění přes imunoadsorpční kolonu OtaCLEAN SMART
• Přímé vpravení do HPLC s fluorescenční detekcí

Chromatografické podmínky:

• Mobilní fáze acetonitril/voda/methanol 5/40/55 obj. % s 1 % octové kyseliny
• RP C18 analytická kolona
• Průtok 0,6 ml/min
• Excitace 335 nm, emise 465 nm

Použitá instrumentace

• FREESTYLE ThermELUTE System
• Imunoadsorpční kolona OtaCLEAN SMART
• HPLC přístroj s fluorescenční detekcí UltiMate 3000 RS
• RP C18 analytická kolona
• Standardní laboratorní vybavení a reagencie

Hlavní výsledky a diskuse

Testovaná metoda dosáhla vysokých výkonů:

• Obnova ochratoxinu A ve vybraných matricích 97 až 104 %
• Detekční limit 0,05 ppb při poměru signálu a šumu 1:5
• Linearita v rozsahu 0 až 12,5 ppb se koeficientem determinace 0,9992
• Analytická kapacita více než 70 vzorků za den

Srovnání s externí laboratoří ukázalo velmi dobrou korelaci výsledků.

Přínosy a praktické využití metody

• Zkrácení doby analýzy na přibližně 30 minut
• Vysoká citlivost v ppt hladině
• Plná automatizace minimalizuje riziko chyb při práci
• Flexibilita pro různé potravinové matrice

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další integrace s monitorovacími systémy kvality potravin v reálném čase a spojení s datovými platformami pro rychlou odezvu na kontaminaci. Vývoj nových imunoafiltračních sorbentů může dále zvýšit selektivitu a snížit náklady na analýzy.

Závěr

Navrhovaná metoda představuje rychlou, přesnou a plně automatizovanou proceduru pro stanovení ochratoxinu A v kávě a podobných matricích. Dosazené výsledky ukazují vysokou spolehlivost, citlivost a provozní efektivitu.

Reference

• Regulation (EC) No 1881 2006 a Regulation (EU) No 105 2010
• Good P et al Mitt Lebensm Hyg 93 2002 186 193
• Scott PM, Kanhere SR Food Addit Contam 12(4) 1995 591 598
• Visconti M, Pascale G, Centonze J Chrom A 864 1999 89 101
• Zimmerli R, Dick J Chrom B Biomed Appl 666 1995 85 99
• Thellmann W, Weber DLR 1(93) 1997 1 3
• Kastrup S, Aulwurm U GIT 9(2002) 975 977