Analysis of Catecholamines Using a Core Enhanced Technology Accucore HPLC Column

Význam tématu

Catecholaminy představují klíčové hormony a neurotransmitery, které ovlivňují kardiovaskulární funkce, metabolismus glukózy a aktivitu sympatického nervového systému. Jejich kvantifikace hraje významnou roli v diagnostice neuroendokrinních onemocnění, hodnocení stresových stavů a monitoringu terapeutických zásahů.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo demonstrovat možnost rychlé a vysoce efektivní separace sedmi katecholaminů a příbuzných sloučenin (katechol, 5-HIAA, DOPAC, serotonin, L-tyrosin, dopamine, L-DOPA) pomocí kolony Thermo Scientific Accucore HILIC (2,6 µm, 150 × 4,6 mm) využívající core–shell technologii při standardních HPLC tlakových poměrech.

Použitá metodika a instrumentace

• Kolona: Accucore HILIC 2,6 µm, 150 × 4,6 mm (PN 17526-154630).
• HPLC systém: Thermo Scientific se UV detekcí při 280 nm, teplota kolony 40 °C, průtok 2,0 mL/min, injekční objem 5,0 µL.
• Mobilní fáze: poměr 85:15 acetonitril : 100 mM formiát amonný, pH 3,2.
• Příprava vzorku: standardní roztoky 30 µg/mL všech analyzovaných látek připravené v mobilní fázi (L-DOPA v 1:1 vodě:mobilní fázi, L-tyrosin v 4:1 5% kyselině mravenčí:mobilní fázi).
• Spotřební materiál: HPLC třída voda, acetonitril, formiát amonný, kyselina mravenčí (Fisher Scientific), vials (Thermo Scientific).

Hlavní výsledky a diskuse

Všechny analyty byly odděleny v rozmezí 0,74–3,20 min při přibližně 157 bar. Tvar piků byl symetrický a optimalizovaný pro HILIC režim, s výbornou reprodukovatelností retenčních časů (šest opakovaných injekcí bez významné odchylky). Core–shell částice 2,6 µm umožnily nízké zpětné tlaky a vysokou efektivitu separace.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí rychlou analýzu sedmi katecholaminů pod čtyřmi minutami na konvenčních HPLC systémech bez nutnosti ultra vysokotlaké instrumentace. Vysoký vzorkový průchod a robustnost umožňují implementaci v klinických laboratořích, farmaceutickém vývoji a QA/QC prostředích.

Budoucí trendy a možnosti využití

Dalšími směry jsou rozšíření aplikace na širší spektrum polar analyzátů, kombinace s hmotnostní spektrometrií pro zvýšení citlivosti a selektivity a vývoj automatizovaných high-throughput protokolů pro klinickou diagnostiku a výzkum neurotransmiterů.

Závěr

Accucore HILIC kolona s core–shell částicemi 2,6 µm prokázala schopnost efektní a rychlé separace katecholaminů s vynikajícími pikovými tvary a nízkými tlaky. Metoda je vhodná pro rutinní analýzy a vysoce propustné pracovní postupy v různých oblastech analytické chemie.