Analysis of β-agonists Using a Core Enhanced Technology Accucore Phenyl-Hexyl HPLC Column

Význam tématu

β-agonisty jsou syntetické sloučeniny s klíčovým významem v léčbě respiračních onemocnění a zároveň zneužívané jako růstová činidla v živočišné výrobě. Jejich přítomnost v potravinářských produktech představuje zdravotní riziko, proto jsou vyžadovány rychlé, citlivé a spolehlivé analytické metody pro kontrolu veterinárních a regulačních orgánů.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo ukázat možnost rychlé chromatografické separace směsi šesti β-agonistů (terbutalin, cimaterol, salbutamol, ractopamin, clorprenalin, clenbuterol) za méně než 6 minut pomocí HPLC kolony Accucore Phenyl-Hexyl a následné LC/MS detekce. Autoři demonstrují optimalizaci podmínek pro dosažení dostatečné citlivosti a rychlosti analýzy.

Použitá metodika

Vzorek obsahoval standardní směs β-agonistů v metanol/voda (95:5, v/v) s koncentrací 10 µg/mL, která byla ředěna vodou v poměru 1:10. Chromatografie probíhala gradientní elucí s mobilní fází A (ammoniumacetát 5 mM, pH 4) a B (acetonitril). Gradient startoval na 5 % fáze B, do 10. minuty dosáhl 100 % a následně byl vrátil na počáteční podmínky.

Použitá instrumentace

• Kolona Thermo Scientific Accucore Phenyl-Hexyl, 2.6 µm, 100 × 2.1 mm (Part No. 17926-102130)
• UHPLC systém Thermo Scientific Accela (teplota kolony 40 °C, průtok 0.25 mL/min, objem injekce 1 µL)
• LC/MS systém Thermo Scientific MSQ v režimu pozitivního ESI (sonda 450 °C, napětí 4.5 kV, cone voltage 60 V, sken m/z 150–350)

Hlavní výsledky a diskuse

Analýza vedla k separaci šesti β-agonistů během 6 minut s dobrým rozlišením špiček, byť ne úplnou základní rezolucí jednotlivých sloučenin. Díky kombinaci hydrofobních interakcí (C6 řetězec) a π–π interakcí (fenylová skupina) v chromatografické fázi bylo dosaženo účinného oddělení. Díky jádrově-porézní konstrukci částic (2.6 µm) se udržely nízké provozní tlaky (~120 bar) při vysoké efektivitě separace.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí významné zkrácení doby analýzy, vysokou citlivost a robustnost vhodnou pro rutinní monitoring reziduí β-agonistů v potravinách. Nižší tlak oproti sub-2 µm materiálům prodlužuje životnost kolony a snižuje nároky na údržbu zařízení.

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se širší aplikace jádrově-porézních materiálů v UHPLC pro další třídy reziduí ve stravovacích řetězcích. Kombinace rychlé chromatografie s vysokorozlišovacími MS systémy může vést k ještě citlivějším a selektivnějším postupům. Další směr představuje integrace s automatizovanými vzorkovači a online SPE pro vysokoprůtokové analýzy.

Závěr

Studie prokázala, že Accucore Phenyl-Hexyl HPLC kolona v kombinaci s LC/MS dokáže za méně než 6 minut spolehlivě separovat klíčové β-agonisty s dostatečnou citlivostí pro regulační kontroly. Metoda nabízí rychlost, robustnost a nízké provozní tlaky, což je výhodné pro rutinní analýzu reziduí v potravinách.