SOLA solid-phase extraction (SPE) method development guide

Význam tématu

SPE je primární technika pro izolaci a koncentrování analytů z komplexních biologických vzorků, zajišťuje vyšší přesnost, preciznost a potlačení matrixových efektů při hmotnostní spektrometrii.

Cíle a přehled studie / článku

Článek přináší metodický návod na vývoj a optimalizaci solid-phase extraction (SPE) bioanalytických protokolů s využitím Thermo Scientific SOLA a SOLAµ produktů. Popisuje Embedded Particle Technology (EPT), porovnání fritless a konvenčního SPE a praktické pokyny pro výběr chemie sorbentu, hmotnost vrstvy a formát zařízení.

Použitá metodika a instrumentace

Metoda využívá polymerní EPT sorbenty bez fritů, které kombinují medii a filtrační materiál do soudržného sorbentního lože. Proces zahrnuje conditioning, equilibration, load, wash a elute kroky s optimalizací pH, organické složky a objemů. Elution profiling a škálování metod umožňují přenos stávajících postupů na mikroeluci (SOLAµ) i větší objemy (SOLA 30 mg).

Použitá instrumentace

• Thermo Scientific SOLA a SOLAµ SPE kartridže (2, 10, 30 mg) a 96-well destičky
• Embedded Particle Technology pro bezfritové sorbenty
• HyperSep Vacuum Manifold (60103-351)
• HyperSep Glass Block Vacuum Manifold Pump (60104-241, 60104-243)
• Standardní pozitivní/negativní tlakové manifoldy a centrifugační zařízení pro 96-well formát
• LC-MS pro kvantitativní vyhodnocení extraktů

Hlavní výsledky a diskuse

• Odstranění voidingu a channelingu, konzistentní plnění sorbentu a nižší horbilita chyb
• Vyšší čistota extraktů a snížení spotřeby rozpouštědel
• Zvýšení citlivosti až 20× při použití mikroeluce
• Široké spektrum chemických selektivit: HRP, SCX, SAX, WCX, WAX
• Úspěšné škálování metod v rozmezí 10–100 µL až 1–2 mL vzorku
• Snížení maticových efektů, opakovatelnost RSD < 5 %

Přínosy a praktické využití metody

• Vysokoprůtokové zpracování biologických vzorků
• Snížení nákladů díky optimalizaci spotřeby solventů a eliminaci kroků vysušování
• Rychlý přenos existujících metod, jejich miniaturizace a adaptace
• Spolehlivost a přesnost v rutinní bioanalytické praxi a QA/QC

Budoucí trendy a možnosti využití

• Integrace s plně automatizovanými robotickými systémy
• Vývoj udržitelných protokolů s minimálními objemy
• Pokročilé polymerní sorbenty pro cílenou retenci specifických maticových složek
• Propojování s high-throughput LC-MS a využití AI/ML pro optimalizaci metod

Závěr

Technologie SOLA a SOLAµ SPE představují robustní, vysoce reprodukovatelné a výkonné řešení pro moderní bioanalytické aplikace. Nabízejí vyšší čistotu extraktů, výrazné snížení nákladů a snadný přenos metod bez složitého vývoje.