Thermo Scientific Liquid Chromatography Systems

Význam tématu

Moderní chromatografické detekční techniky jsou klíčové pro citlivou analýzu stopových látek v různých oblastech, od farmacie až po environmentální monitoring. Optimalizace poměru délky absorbční dráhy, objemu detekčního článku a šumu detektoru umožňuje dosáhnout nových hranic v minimálním detekčním limitu. Technologie LightPipe posouvá výkon UV detekce HPLC a UHPLC na vyšší úroveň díky kombinaci dlouhé optické dráhy a minimální disperze světla.

Cíle a přehled studie / článku

Článek představuje integraci technologie LightPipe do platformy UltiMate 3000 a porovnává ji s konvenčními diodovými array detektory. Hlavním cílem je demonstrovat zvýšení citlivosti a zlepšení poměru signál / šum u dvou variant LightPipe flow cell s 10 mm a 60 mm optickou dráhou.

Použitá metodika a instrumentace

• Platforma: Thermo Scientific Dionex UltiMate 3000 RS coupled s Vanquish DAD HL
• Flow cells: LightPipe 10 mm (2 µL objemu), LightPipe 60 mm (13 µL objemu), konvenční DAD 10 mm (13 µL) a 7 mm (2,5 µL)
• Kolony: Hypersil GOLD C18 2,1 x 100 mm, 1,9 µm; Acclaim C18 4,6 x 150 mm, 3 µm
• Mobilní fáze: voda / acetonitril, gradientní režim
• Pracovní režim: průtok 0,7–2,2 mL/min, teplota 35 °C, vlnová délka 254 nm, rozlišení 4 nm, rychlost skenování 20 Hz
• Testované analyty: uracil, acetanilid, acetofenon, propiofenon, butyrofenon, benzofenon, valerofenon, hexanofenon, heptanofenon, oktanofenon

Hlavní výsledky a diskuse

• LightPipe 10 mm vs konvenční 10 mm: nárůst výšky píků o 30–40 % díky optimalizovanému objemu a dlouhé optické dráze
• LightPipe 60 mm vs konvenční 10 mm: až šestinásobné zvýšení intenzity signálu při mírném rozšíření šířky píků
• Disperze píků je omezena tenkou kapilární geometrií, což zachovává účinnost UHPLC
• S/N zlepšeno 2–4krát u 10 mm LightPipe a 5–14krát u 60 mm LightPipe v porovnání s konvenčními články
• Odolnost proti změnám refrakčního indexu během gradientní eluce vede k hladší bazální čáře a nižšímu šumu

Přínosy a praktické využití metody

• Možnost detekce velmi nízkých koncentrací analytů v HPLC i UHPLC
• Zkrácení doby analýzy při zachování rozlišení a citlivosti
• Vhodné pro aplikace QA/QC, farmaceutickou analýzu a environmentální testy
• Jednoduchá integrace do existujících UltiMate 3000 systémů

Budoucí trendy a možnosti využití

• Další prodlužování optické dráhy a miniaturizace flow cell pro ultra stopovou analýzu
• Integrace s hmotnostní spektrometrií pro vícedimenziální analýzu
• Automatizované optimalizační algoritmy řízené umělou inteligencí pro volbu optimálních parametrů
• Rozšíření detekce do UV–vis spektra pro vícekomponentní kvantifikaci

Závěr

LightPipe technologie v detektoru Vanquish DAD HL pro platformu UltiMate 3000 představuje významný pokrok v oblasti UV detekce. Kombinací dlouhé optické dráhy s nízkým objemem a moderními opticko-elektronickými řešeními bylo dosaženo výrazného zvýšení citlivosti i odolnosti vůči gradientním artefaktům. Tento detektor doporučujeme pro náročné analytické aplikace vyžadující nejnižší detekční limity.

Reference

• Thermo Fisher Scientific Inc Product Spotlight SP71543 EN 0315S