Highly sensitive simultaneous analysis of tetracyclines and β-lactams antibiotics in edible meat by LC/MS/MS

Význam tématu

Současná detekce reziduí veterinárních antibiotik v potravinách je nezbytná pro ochranu veřejného zdraví a prevenci vzniku bakteriální rezistence. Metody založené na LC-MS/MS umožňují dosáhnout vysoké citlivosti a selektivity při analýze stopových koncentrací tetracyklinů a β-laktamových antibiotik v mase.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo vyvinout rychlou, spolehlivou a citlivou metodu pro simultánní stanovení dvaceti veterinárních léčiv (tetracykliny, peniciliny, cefalosporiny) v kuřecím mase. Důraz byl kladen na zkrácení doby analýzy pod 10 minut, validní kvantifikaci v rozsahu 1–40 ng/ml a dosažení přijatelné obnovy analyta.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorce masa byly homogenizovány a deproteinovány acetonitrilem, následovalo odmaštění hexanem a čištění na kartridži InertSep PLS-2 (SPE). Analytická část proběhla na UHPLC Nexera X3 coupled s triple kvadrupolovým spektrometrem LCMS-8060NX (Shimadzu). Kolona Shim-pack Scepter C18-120 [Metal free] (100×2,1 mm, 1,9 µm); mobilní fáze A: 2 mmol/l amoniový formiát ve vodě s 0,1 % formiové kyseliny, B: methanol; gradientní program 5→70→95 % fáze B během 15 minut; ionizace ESI pozitivní, MRM modus.

Hlavní výsledky a diskuse

Simultánní separace všech 20 sloučenin byla dokončena do 10 minut. Linearity v rozsahu 1–40 ng/ml vykazovala koeficient determinace R2 ≥ 0,996. Přesnost kalibrace byla v rozmezí 80–115 %, opakovatelnost ploch (RSD) ≤ 7,3 %. Analýza obnovy v kuřecím prsu i stehně ukázala hodnoty 70–120 % u 75–80 % testovaných látek. Amoxicilin vykazoval nízkou obnovu (~10 %) kvůli vysoké polaritě a nižší retenci na sorbentu.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlý screening a kvantifikace reziduí antibiotik v potravinářských vzorcích.
• Vysoká citlivost a selektivita vhodná pro rutiní kontrolu QA/QC.
• Snížení doby analýzy a spotřeby rozpouštědel.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření metody na další třídy veterinárních léčiv a metabolity.
• Integrace automatizované předúpravy online s UHPLC-MS/MS.
• Miniaturizace a využití mikroflow LC-MS pro šetření vzorku a solventu.

Závěr

Vyvinutá metoda LC-MS/MS s Nexera X3 a LCMS-8060NX umožňuje spolehlivou, rychlou a citlivou simultánní analýzu 20 antibiotik v mase. Dosahuje vynikající linearity, opakovatelnosti a obnovy pro většinu sloučenin, což ji činí vhodnou pro rutinní kontrolu bezpečnosti potravin.

Reference

• BUNSEKI KAGAKU, Vol.66, No.5, pp.369-374 (2017)
• Food Hygiene and Safety Science, Vol.61, No.4, pp.109-118 (2020)