Determination of Regulated and Emerging Mycotoxins in Cereals, Nuts, Figs, and Animal Feeds Using Pass-Through SPE and UPLC- MS/MS

Význam tématu

Mykotoxiny jsou nebezpečné sekundární metabolity plísní často se vyskytující v obilninách, ořeších, sušených fíkg a krmivech. Jejich sledování je klíčové pro zajištění bezpečnosti potravin a ochranu zdraví spotřebitelů i zvířat. Regulace mykotoxinů se neustále rozšiřuje o nové vzorky, což vyžaduje rychlé a spolehlivé analytické metody s nízkými limity stanovení.

Cíle a přehled studie / článku

V této práci autoři představují univerzální analytickou metodu pro stanovení 31 regulovaných a nově sledovaných mykotoxinů v různorodých matricích (obilniny, ořechy, fíky, krmiva). Cílem bylo vyvinout postup s vysokou návratností analytů, jednoduchou přípravou vzorku a splňující požadavky současné legislativy.

Použitá metodika

Pro extrakci bylo použito 5 g homogenizovaného vzorku a směs acetonitrilu s vodou obsahující kyselinu octovou a mravenčí. Po odstředění následovala pasážní SPE čistící procedura na Oasis PRiME HLB cartridge bez předchozí kondice a vyrovnání. Purifikovaný extrakt se naředil vodou v poměru 1:5 a filtrován injekční stříkačkou před UPLC-MS/MS analýzou. Kvantifikace probíhala metodou standardu v matrici.

Použitá instrumentace

• UPLC přístroj s Flow Through Needle injektorem
• Kolona BEH C18 (2,1 × 100 mm, 1,7 µm)
• Xevo TQ S micro triple quadrupolární hmotnostní spektrometr
• Software MassLynx s modulem TargetLynx pro zpracování dat

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda dosahuje limity stanovení 0,25 µg/kg pro aflatoxiny a 1 µg/kg pro ochratoxin A. Obnovitelnost analýz se pohybuje mezi 60 a 108 s RSD pod 11 %, přičemž splňuje požadavky SANTE a regulace EU. Chromatografie umožnila oddělení klíčových izomerů DON-3-Glu, 3-Ac-DON a 15-Ac-DON. Ověření na referenčních materiálech prokázalo trueness 71 až 99 % a opakovatelnost 0,5 až 7 %.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlá a jednoduchá příprava vzorku díky pasážní SPE
• Široké spektrum analyzovaných mykotoxinů v různých potravinových matricích
• Nízké limity stanovení odpovídající regulačním požadavkům
• Možnost budoucího rozšíření o další analytické sloučeniny

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se rozšíření legislativních limitů pro nové a modifikované mykotoxiny. Metodu lze upravit pro širší repertoár sloučenin díky variabilitě SPE a konfigurovatelné UPLC-MS/MS. Důležitá je integrace dat pro rychlou odezvu na nové rizikové látky a přechod k high throughput screeningovým systémům.

Závěr

Navržená metoda kombinující pasážní SPE na Oasis PRiME HLB a UPLC-MS/MS nabízí rychlý, spolehlivý a citlivý postup pro více než 30 mykotoxinů v potravinách a krmivech. Splňuje mezinárodní požadavky na kvalitu analýzy a má potenciál pro další rozšíření analytického spektra.

Reference

• Agriopoulou S et al Foods 2020 9 137
• Oasis Cartridges care use manual Waters Corp 2014
• Magnusson B Örnemark U Eurachem Guide 2014
• SANTE 12089 2016 Guidance Document Identification Mycotoxins
• Commission Regulation 401 2006 Sampling Analysis Mycotoxins