Analysis of Synthetic Cannabinoids from W hole Blood for Forensic Toxicology Using Ostro Sample Preparation Plates and CORT ECS UPLC Solid-Core Columns

Význam tématu

Syntetické kanabinoidy představují rostoucí výzvu pro forenzní toxikology a orgány činné v trestním řízení. Tyto „Spice“ sloučeniny imitují účinky přírodních kanabinoidů a jejich rapidně měnící se struktury obcházejí legislativu. Spolehlivá a univerzální analýza v biologických matricích je proto zásadní pro identifikaci a kvantifikaci nových látek.

Cíle a přehled studie

Cílem aplikace bylo vyvinout jedinou metodiku pro extrakci a kvantifikaci 22 syntetických kanabinoidů a jejich metabolitů z plné krve. Studie demonstrovala:

• univerzální vzorek přípravy,
• vysoké výtěžky extrakce nad 90 % u většiny látek,
• lineární kalibraci v rozsahu 2–500 ng/ml,
• minimální matrixové efekty pod 15 %.

Použitá metodika a instrumentace

Pro přípravu vzorků byly využity Ostro 96-jamkové destičky pro simultánní vysrážení bílkovin a čištění extraktu. 50 µl krve bylo smíseno s roztokem ZnSO4/NH4OAc, precipitováno acetonitrilem a eluováno do kolekční destičky. Analýza byla prováděna na UPLC systému ACQUITY se sloupci CORTECS C18 (1,6 µm, 2,1×100 mm) a detekcí na trojitě kvadrupólovém MS (Xevo TQD) v režimu ESI pozitivním módu s MRM přechody.

Hlavní výsledky a diskuse

Analytická separace ve 7,5 min rozlišila i izobarické páry metabolitů s rozlišením nad 1,0, kde plně-porézní sloupce selhávaly. Výtěžky extrakce se pohybovaly mezi 73–105 % (průměr 92 %). Matrixové efekty byly u většiny látek pod 15 %. Kalibrační křivky vykazovaly koeficient determinace R2>0,99 pro 21 z 22 sloučenin. Kvalitativní a kvantitativní kontroly (7,5; 75; 300 ng/ml) prokázaly přesnost 79–104 % a RSD <13 %.

Přínosy a praktické využití metody

Tato metoda nabízí forenzním laboratořím:

• rychlou a univerzální přípravu vzorku,
• vysokou účinnost extrakce a reprodukovatelnost,
• schopnost detekce nízkých koncentrací od 2 ng/ml,
• adaptabilitu na nově se objevující kanabinoidy s limitovanými úpravami protokolu.

Budoucí trendy a možnosti využití

S rozvojem nových derivátů syntetických kanabinoidů bude vyžadována další rozšíření panelu látek. Metoda je vhodná pro automatizovanou high-throughput analýzu, integraci stabilních izotopových interních standardů a aplikaci v hromadných screeningových programech. Kombinace s HRMS technikami může dále zlepšit identifikaci neznámých metabolitů.

Závěr

Použití Ostro destiček a solid-core UPLC sloupců CORTECS umožňuje rychlou, citlivou a spolehlivou analýzu širokého spektra syntetických kanabinoidů v plné krvi. Metoda poskytuje vysoké výtěžky, minimální matrixové účinky a vynikající chromatografické rozlišení, což je klíčové pro forenzní aplikace.

Reference

1. Seely KA a kol. Spice drugs are more than harmless herbal blends: A review of the pharmacology and toxicology of synthetic cannabinoids. Progress in Neuro-Psychopharmacology and Biological Psychiatry. 2012; 39(2):234–243.
2. Wohlfarth A, Weinmann W. Bioanalysis of new designer drugs. Bioanalysis. 2010; 2(5):965–979.