Agilent Poroshell 120 columns – Now with 4 μm particle size

Význam tématu

Kolony Agilent Poroshell 120 představují moderní řešení pro HPLC i UHPLC separace, které kombinují vysokou účinnost separace sub-2 μm částic s nízkou provozní zpětnou tlakem. Díky tomu nabízejí chromatografům a vývojovým laboratořím možnost zvýšit rychlost a rozlišovací schopnost analýz bez výrazné úpravy existujících metod.

Cíle a přehled studie

Studie se zaměřuje na rozšíření rodiny Poroshell 120 o nové 4 μm částice a na porovnání jejich separačních parametrů s konvenčními 5 μm částicemi a již zavedenými 2,7 μm částicemi. Klíčovými cíli jsou:

• Posoudit efektivitu teoretických desek a rozlišení
• Stanovit provozní tlakové nároky při vysokých průtocích
• Ukázat flexibilitu výběru chemie povrchu

Použitá metodika a instrumentace

Pro experimenty byly použity běžné HPLC a UHPLC systémy vybavené sloupci Poroshell 120 v délkách 50–250 mm a průměrech 2,1–4,6 mm s částicemi 2,7 a 4 μm. Mobilní fáze sestávala převážně z acetonitrilu nebo methanolu s vodou a kyselinou octovou. Typické podmínky:

• Průtok 1.2–2.0 mL/min
• Teplota 25 °C
• Detekce UV při 220–254 nm

Hlavní výsledky a diskuse

Nové 4 μm sloupce Poroshell 120:

• Zvýšily počet teoretických desek až dvojnásobně ve srovnání s 5 μm sloupci
• Udržely nízké provozní tlaky přibližně na úrovni 95–165 barů
• Dosáhly zvýšení účinnosti o 79 % při stejném čase a o 24 % při zkrácení běhu o 40 %

Další experimenty ukázaly, že speciální fáze PFP vynikají v separaci polohových isomerů a phenyl-hexyl fáze poskytují lepší rozlišení steroidních sloučenin díky pji-pji interakcím.

Přínosy a praktické využití metody

Výsledky demonstrují, že Poroshell 120 4 μm sloupce lze snadno nasadit jako drop-in náhradu stávajících 5 μm sloupců. Hlavní přínosy:

• Zvýšení kapacity laboratorní produkce a zkrácení doby analýzy
• Rozšířená nabídka chemických modifikací (C18, PFP, phenyl-hexyl, HILIC)
• Odolnost vůči nečistotám díky jemným fritám a možnosti použití rychlých guard sloupců

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další rozvoj hybridních částicových technologií a nanoslitových povrchů pro optimalizaci separací v mikroproudových systémech. Integrace s hmotnostní spektrometrií a automatizovanou přípravou vzorků otevře cestu k aplikacím v klinické diagnostice, biofarmaceutickém vývoji a sledování stopových látek v životním prostředí.

Závěr

Poroshell 120 4 μm sloupce představují vyvážené řešení mezi konvenčními a ultra vysokým výkonem částicemi. Nabízejí výrazné zvýšení účinnosti, nízký provozní tlak a flexibilitu metodického vývoje bez potřeby rozsáhlých úprav chromatografických systémů.

Použitá instrumentace

HPLC a UHPLC systémy Agilent se sloupci Poroshell 120 (2.7 a 4 μm) a UV detektory.